动物医学专业毕业论文范文

1.动物医学毕业论文怎么写呢

毕业论文格式

1、论文题目:要求准确、简练、醒目、新颖。

2、目录:目录是论文中主要段落的简表。(短篇论文不必列目录)

3、提要:是文章主要内容的摘录,要求短、精、完整。字数少可几十字,多不超过三百字为宜。

4、关键词或主题词:关键词是从论文的题名、提要和正文中选取出来的,是对表述论文的中心内容有实质意义的词汇。关键词是用作机系统标引论文内容特征的词语,便于信息系统汇集,以供读者检索。每篇论文一般选取3-8个词汇作为关键词,另起一行,排在“提要”的左下方。

主题词是经过规范化的词,在确定主题词时,要对论文进行主题,依照标引和组配规则转换成主题词表中的规范词语。

5、论文正文:

(1)引言:引言又称前言、序言和导言,用在论文的开头。引言一般要概括地写出作者意图,说明选题的目的和意义, 并指出论文写作的范围。引言要短小精悍、紧扣主题。

〈2)论文正文:正文是论文的主体,正文应包括论点、论据、论证过程和结论。主体部分包括以下内容:

a.提出-论点;

b.分析问题-论据和论证;

c.解决问题-论证与步骤;

d.结论。

6、一篇论文的参考文献是将论文在和写作中可参考或引证的主要文献资料,列于论文的末尾。参考文献应另起一页,标注方式按《GB7714-87文后参考文献著录规则》进行。

中文:标题--作者--出版物信息(版地、版者、版期):作者--标题--出版物信息所列参考文献的要求是:

(1)所列参考文献应是正式出版物,以便读者考证。

(2)所列举的参考文献要标明序号、著作或文章的标题、作者、出版物信息。

2.我是动物医学系兽医专业,我想求一篇毕业论文,既简单还能一次性

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3.求一篇关于宠物医疗方面的毕业论文和一偏畜牧兽医专业毕业论文

1、[动物医学]猪场免疫程序的建立和正确使用疫苗 摘要:猪群的健康是经营猪场成败的重要关键。

近几年来,养猪业不断向规模化、集约化发展,同时,由于畜禽及其产品的频繁流通和交易,猪的疫病比较严重。据估计规模化猪场因病死亡率平均在5%~20%不等。

尽管养猪。 2、[动物医学]猪瘟的诊断与防治方法的探讨 摘要:猪瘟可分为急性、亚急性、慢性、不典型或不明显型猪瘟。

CSF由强毒引起:高发病率、高死亡率.不典型猪瘟由弱毒引起、表现不明显. 猪瘟严重威胁养猪业的发展。近两年来,猪瘟病的发生在我市养猪业中有流行。

3、[动物医学]猪圆环病毒2型ORF2结构蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 中文摘要猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是引起猪断奶后多系统衰竭综合征等相关疾病的重要病原。PCV2的ORF2基因编码该病毒结构蛋白,是区分PCV1和PC。

4、[动物医学]动物剥制标本的创新应用 中 文 摘 要生物标本制作是一项具有多学科知识的专门技术,始于英国,至今已有300年的历史。我国的动物标本制作技术是在欧洲标本制作技术的基础上逐步发展起来的,早期形成了具有自己风格的两大派系,即南唐北。

口蹄疫简介 口蹄疫是一种以病毒为载体的疾病,主要受感对象为猪、牛等大型偶蹄兽类,老鼠和家兔也是高发种群,潜伏期有几天至半个月不等,接触、空气、食物等均可导致疾病传播,如遇大风或兽群的大批运输则传染更快。口蹄疫发病后一般不致死,但会导致病兽口、蹄部出现大量水泡、高烧不退,使实际产量锐减。

另外,个别口蹄疫病毒的变种亦可传染给人。因此,每次爆发后只能屠宰和集体焚毁以绝后患。

由于口蹄疫传播迅速,难于防治,补救措施少,被称为“头号杀手”。 口蹄疫可人畜共患。

人因接触口蹄疫病畜及其污染的毛皮,或误饮病畜的奶,或误食病畜的肉品等途径感染。人一旦受到口蹄疫病毒传染,经2——18天潜伏期突然发病,表现为发烧、口腔干热、唇、齿、舌边颊部、咽部潮红、出现水泡(皮肤水泡见于手指尖、手掌、脚趾),同时伴有头痛、恶心、呕吐或腹泻,患者数天痊愈,有时可并发心肌炎,患者对人基本无传染性,但可把病毒传染给牲畜动物,再度引起畜间口蹄疫流行。

1 口蹄疫临床症状 1.1 本病以牛最易感 最初体温升高,精神沉郁,食欲减退或废绝,反刍缓慢或停止,不喜饮水,闭口呆立,开口时,大量流涎。病畜口腔黏膜、齿龈、唇部、舌部及趾间等发生水泡或糜烂。

起初水泡只有豌豆大,继而融合增大或连成片状,1——2天破溃后,形成红色烂斑。很多病例出现条状,高低不平的水泡。

用手抓取舌时,常能见大片地脱落,偶见有鼻镜、角茎、乳房上发生水泡。在发生口腔水泡后或同时在蹄冠、蹄踵和趾间发生水泡或烂斑,若破溃后被细菌污染,时发跛行严重,幼牛常并发严重的胃肠炎。

1.2 羊的感染率低 病羊口腔黏膜上可见到水泡、烂斑和弥漫性炎症变化。山羊比绵羊明显,但主要症状在蹄部,哺乳羔羊对口蹄疫特别敏感,常呈现出血性胃肠炎和心肌炎症状,发病急、死亡快。

2 防治 2.1 预防 病畜疑似口蹄疫时,应立即报告兽医机关,病畜就地封锁。所用器具及污染地面用2%苛性钠消毒,确认后,立即进行严格封锁、隔离、消毒及防治一系列工作,发病畜群扑杀后要无害化处理,工作人员外出要严格全面消毒,病畜吃剩的草料或饮水,要烧毁或深埋。

畜舍及附近用2%苛性钠、1%——2%福尔马林喷洒、消毒,以免散毒。对疫区周围牛羊接种,选用与当地流行的毒型相同的疫苗、疫种。

2.2 治疗 口腔有溃疡时,用碘甘油合剂每天涂3——4次,用大蒜或10%食盐水也可。蹄部病变,可用消毒液洗净,涂甲紫溶液或碘甘油。

并用绷带包裹,不可接触湿地。 对病畜要加强饲养管理及护理工作。

每天要用盐水、硼酸溶液等洗涤口腔及蹄部,要喂以软草、软料或麸皮粥等。 晨报讯 据英国广播公司23日报道,有迹象表明,英国口蹄疫疫情有可能已经传染给人类。

英国卫生部已开始对此进行调查。 报道说,口蹄疫疫情严重的坎布里亚郡一名屠宰工人可能已经传染上口蹄疫这名屠宰工人曾多次接触受口蹄疫感染的牲畜。

英国卫生部一位发言人透露,该屠宰工人患有牲畜口蹄疫的“所有症状”,包括手脚及口腔内起水泡等。如果病情得到确认的话,他将是英国历史上第二个患口蹄疫的人。

但英国科学家指出,牲畜将口蹄疫传染给人类的可能性非常小。即使有人染上口蹄疫,病情也很轻,目前还没有口蹄疫疫情在人类中传播的记录。

英国1966年爆发口蹄疫疫情时,曾有一人感染了口蹄疫,但对他的健康没有带来任何影响 为你锝母猪默哀3秒。.^-^。

4.动物医学毕业论文论文方向:动物(猪、鸡、羊等)群发病的研究 什么

龟的影像学和血液学研究

摘要:龟鳖以颈和四肢的伸缩运动而产生呼吸,先呼气,后吸气,这种特殊的呼吸方式叫做“咽气式”呼吸,简称龟吸。应用现代先进的医疗诊断技术,我们对1只缅甸陆龟进行螺旋CT、磁共振成像(MRI)和磁共振血管造影(MRA)检查,发现龟背甲下方左右各有1个大气囊,腹甲上面的软组织有胸主血管和腹主血管。影像学研究和解剖对比分析,我们发现龟肺发育不良是咽气式龟吸的基础,不健全的龟肺决定了龟的新陈代谢必然缓慢。对龟的血液成份进行定性定量测定,发现龟的红细胞大而有核,中性粒细胞和血小板缺如,这是龟血的奇异现象,我们获得的宝贵资料,对探索乌龟新陈代谢缓慢和长寿机理,提出了新的课题。

关键词:龟螺旋CT MRI 医学检验

应有螺旋CT、磁共振成像(MRI)和磁共振血管造影(MRA)的先进医疗诊断技术,我们对1只缅甸陆龟进行影像学检查,龟的呼吸系统做了影像学研究和解剖对比分析,并对龟的血液成份进行了测定,资料报道如下,供同道们参考分析。

1、科研目的:

了解龟体软组织结构,对龟的呼吸系统进行影像学研究和解剖对比分析,探索乌龟新陈代谢缓慢的机理。

2、实验材料:

缅甸陆龟又名象龟,俗名Elongated tortoise(拉丁学名Indotestudo elongata),属龟鳖目、曲颈龟亚目、陆龟科、缅甸陆龟属。实验象龟体重3000g,头项部淡黄色,有对称鳞片,吻印,上喙略勾曲,鼻孔粉红色,背腹甲被覆角质盾片完整无损。背甲隆起光滑平坦……

5.动物医学论文

【动物医学论文】探讨防治应激条件下大鼠哮喘的作用 [论文摘要]目的:探讨心理因素对哮喘发病的影响和调肝法调节应激、防治哮喘的作用机制。

方法:用卵蛋白加束缚应激刺激建立应激条件下哮喘大鼠模型,采用放射免疫分析法、酶联免疫吸附法、原位杂交、免疫组化、光镜及电镜等方法,检测各组大鼠血浆皮质酮、白细胞介素4、干扰素γ、海马糖皮质激素受体mRNA和下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(adrenocorticotropic hormone corticoliberin, CRH)阳性神经元,并观察肺和海马组织形态学的变化。结果:疏肝理肺方可明显降低血浆皮质酮水平,升高血浆干扰素γ,降低血浆白细胞介素4,减少下丘脑室旁核CRH阳性神经元,上调海马CA3区糖皮质激素受体mRNA的表达,减轻海马神经元的损伤,并可明显减轻应激条件下哮喘大鼠肺组织的病理改变。

结论:疏肝理肺方通过抑制应激条件下哮喘大鼠下丘脑垂体肾上腺皮质轴功能的亢进及调节免疫系统的功能,从而起到防治哮喘的作用。[论文关键词]应激; 哮喘; 疏肝理肺法 Protective and therapeutic effects of Shugan Lifei Recipe on rats with asthma under stress and the mechanisms ABSTRACT Objective: To explore the influence of psychological factor on asthma, the protective and therapeutic effects of Shugan Lifei Recipe on rats with asthma under stress and the mechanisms. Methods: Allergy and stressinduced asthma models were established in rats by giving ovalbumin and restraining stress. Radioimmunoassay, enzyme linked immunosorbent assay, in situ hybridization and immunohistrochemical method were used to detect plasma corticosterone, IL4, IFNγ, expression of glucocorticoid receptor (GR) mRNA in hippocampus and adrenocorticotropic hormone corticoliberin (CRH) positve neuron in hypothalamus. Optical and electron microscopes were used to observe the morphological changes of pulmonary hilar and hippocampal tissues.Results: Shugan Lifei Recipe (SGLFR) could reduce plasma corticosterone, decrease CRH positive neurons in paraventricular nucleus of hypothalamus, upregulate the expression of GR mRNA in hippocampus and reduce the injury of hippocampal neuron. SGLFR had certain inhibitive effect on hyperfunction of cortex (HPA) axis in rats with asthma under stress and could also relieve the pathological changes of the pulmonary hilar tissue. The level of plasma IFNγ was increased while the level of plasma IL4 was decreased in SGLFRtreated group. Conclusion: The mechanism of SGLFR in treating the rats with asthma under stress is probably to regulate the hyperfunction of HPA axis and the disorder of immuosystem. KEY WORDS stress; asthma; dispersing stagnated liver qi and regulating lung qi 支气管哮喘是一种多病因疾病,发病机制十分复杂,严重危害人类的健康。

其发病受生物、心理和社会三方面因素的影响,其中精神心理因素在哮喘的发生、发展和转归中起着重要的作用。现代社会工作和生活节奏日益加快,竞争日趋激烈,机体长期处于紧张状态下,通过影响神经内分泌系统继而干扰机体的免疫功能,从而诱发或加重哮喘。

中医学很早就认识到不良的环境或精神刺激与躯体疾病的发生、发展有密切的关系。肝主疏泄,调畅气机,在心理应激调节中起着决定性的作用。

现代医学认为:任何形式的应激都可导致神经内分泌功能紊乱,造成免疫功能障碍,使机体对各种感染性疾病呈易感状态。大量研究表明:肝主疏泄功能与现代医学的神经内分泌免疫网络密切相关,调肝法有调整神经内分泌免疫功能失调的作用。

本实验运用疏肝理肺方治疗应激条件下的哮喘大鼠,探讨心理因素对哮喘发病的影响以及调肝法调节应激、防治哮喘的作用机制。 1材料与方法 1.1实验动物分组及模型建立 SD雄性大鼠56只,体质量(190±20)g,随机分为7组:正常组、哮喘组、应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组,每组8只。

哮喘组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠分别予以腹腔注射抗原液(含卵蛋白、氢氧化铝干粉和灭活百日咳杆菌)1 ml致敏;正常组和应激组大鼠则分别予以腹腔注射等量生理盐水。致敏后第8天起,应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠予以双后肢立式固定,行束缚应激刺激,4 h/d,共3周;致敏后第8天起,哮喘组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠另分别予以2%卵蛋白雾化吸入,3 min/d,共2周。

1.2药物及给药方法 理肺方(Lifei Recipe, LFR)即小青龙汤,由麻黄9 g、桂枝9 g、炙甘草9 g、细辛9 g、干姜9 g、半夏9 g、五味子9 g和白芍9 g组成;疏肝理肺方(Shugan Lifei Recipe, SGLFR)即小青龙汤合四逆散,由麻黄9 g、桂枝9 g、炙甘草9 g、细辛9 g、干姜9 g、半夏9 g、五味子9 g、白芍9 g、柴胡9 g和炙枳实9 g组成。理肺方和疏肝理肺方用水煎制后滤液,制成浓缩口服液,分别含。

6.跪求一篇关于动物医学的五千字论文谢谢

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当前猪高热复合症的治疗方法及预防对策

近几年,猪的高烧不退,即所谓的猪“高热复合症”发生较多,给养猪业带来严重的损失,以致许多猪场倒闭,许多农户不敢养猪。猪高热复合症是由多种病原体引起的一种以病猪持续高温、食欲废绝、皮肤发红为主要特征的复合性传染病,主要有猪附红细胞体病、猪伪狂犬病、非典型性猪瘟、蓝耳病、圆环病毒病、传染性胸膜肺炎等引起,多为混合感染或继发感染。该病自去年六月份发病以来,发病状况及发病原因与往年不同,出现了一些新特点,因而在诊断和治疗我们研究所总结了一些切实可行的治疗方法及预防对策,现介绍如下,供同行参考:

1 主要临床症状

病猪体温升高40OC-42OC,食欲减退或废绝,精神沉郁,淌眼屎,卧地不起,运动失调,呼吸急促,鼻流清涕,粪便干硬,小便发黄,全身皮肤发红,或腹部、耳尖发绀;或在耳根、腹部、四肢内侧等处出现紫红色血点;或眼圈青紫,肛门周围青紫。个别猪发病数天后皮肤黄染或苍白,少部分猪毛孔针尖状出血。有的猪腹泻,发抖、消瘦。四肢、眼睑周围水肿,体表淋巴结肿大。公猪不育,母猪不易受孕,怀孕猪易早产,死胎、木乃伊胎。

2 剖检变化

从对病猪剖检情况来看,病猪的病变以肺部变化为主,肺脏有的苍白,有的有出血点、出血斑;有的肺脏水肿,呈斑驳状到褐色大理石样病变,有的实质变性,如海绵状,可在水中飘浮;有的似水煮状;更有很多病猪的肺脏多处部位肉变,特别是尖叶、心叶和膈叶的前缘,,部分病变肺叶支气管内充满脓性分泌物;气管内有较多的泡沫,部分气管环黏膜充血。心肌有出血点,心包积液,为淡黄色液体。肝脏有的灰白色;有的有坏死灶;有的有出血点,有的肿大变性呈黄棕色,表面有黄色条纹状或灰白色坏死灶。肾脏肿大、呈褐色或土黄色,质地较脆,有淤血现象;有的有大量针尖状出血点;有的表现典型的大理石样花纹;有的有坏死点、坏死斑。脾脏肿大、边缘有多处梗死灶。胃充血、出血;部分猪胃底粘膜出血、坏死、溃疡,回盲肠有大量溃疡灶。肠出血严重,特别是小肠和结肠多数有坏死灶。淋巴结广泛肿大,特别是腹股沟淋巴结和肺门淋巴结。部分病猪喉头粘膜水肿、出血,猪膀胱粘膜出血。个别患猪表现多发性浆液纤维素性胸膜炎和腹膜炎。

3 实验室检查情况

猪瘟、猪流感和饲料霉菌毒素检测采用ELISA方法检测,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV-Ⅱ)用RT-PCR(聚合酶链式反应)方法检测,分离到的细菌用生化试验鉴定,弓形体、附红小体的检测分别用脾触片和血涂片进行检查。从实验室检查情况来看,通过对部分发病猪场进行的实验室检测结果发现,猪高热复合症今年的发病状况与往年(2001年-2005年)不同,2005年前在临床中主要以附红细胞体感染为主,少见附红细胞体与蓝耳病、伪狂犬、链球菌等病混合感染;而今年六月份以后,蓝耳病、伪狂犬、圆环病毒的发病率明显高于去年。病毒以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒(PCV-II)、猪流感病毒(SIV)、伪狂犬病毒(PRV)猪瘟病毒(HC)、为主,细菌主要为猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、副猪嗜血杆菌病(HP)、猪链球菌属2型(SS-II)、多杀性巴氏杆菌(PM)等。

7.畜牧兽医专业毕业论文怎么写

摘要:我国兽医管理体制存在一些亟待解决的问题,随着兽医管理体制改革的推进,使我国在重大动物疫病的防控能力得到明显加强。

农业部将加强与有关部门的沟通协调,加大对地方的督促检查力度,争取尽早把兽医管理体制改革工作落实到位。并提出 “建设现代农业基地,大力发展现代畜牧业”,加快现代畜牧业发展,促进社会主义新农村建设的口号。

此文笔者结合自己工作实践,来浅谈一下我国兽医管理体制改革方面的问题!关键词:兽医、体制改革 正文一、前言:在高致病性禽流感、口蹄疫等疫情防控工作上我国取得了重大的胜利. 在这些重大动物疫病防控工作中,我国的兽医工作者作出了很大的贡献!另外随着全国猪肉价格大幅上涨,这也从一个方面要求我国的兽医工作者,更加要做好生猪疾病的防空工作, 降低生猪饲养风险!可见兽医工作是公共卫生工作的重要组成部分,是保持经济社会全面、协调、可持续发展的一项基础性工作。推进兽医管理体制改革,是国务院作出的一项重要决策,是深化行政管理体制改革、完善政府社会管理和公共服务职能的重要步骤,是促进我国兽医工作全面发展、提高动物卫生及动物产品安全水平的一项重要举措。

但我国的兽医管理体制还存在着一些亟待解决的问题,体制的改革也是任重而道远!二、我国兽医管理体制中存在的一些问题1、机构不健全,管理体制不顺兽医工作没有统一机构管理,导致管理体制不顺。目前, 我国兽医管理工作分散到多个部门,不能实施统一管理, 职责不清。

多头管理,职能重叠,造成管理效率低,资源浪费。如内外检分设、商业部门目前还管理部分屠宰企业屠宰检疫、部分畜产品在流通环节的卫生监督仍由卫生部门管理, 防疫工作难以统一协调, 给防检疫工作也带来很多矛盾和困难, 降低了作效率 管理机构设置混乱,职责不清, 行政效能不能正常发挥。

2、基层防疫工作不到位由于多年建设滞后, 我国基层兽医体系一直没有得到快速发展,特别是基层兽医队伍人员素质和技术水平存在明显不足。首先,由于基层防疫机构工作条件艰苦, 待遇较差, 用人机制和竞争机制均不完善,无法引入学历较高的兽医技术人员, 人员年龄结构和知识结构都不合理。

其次,由于基层机构的基础设施较差,多年来大都是“一支针管鸡鸭全打”, 仪器设备还不如管辖区域内的规模化饲养企业的实验室。第三,在改革中由于只看到基层站存在的问题, 不对兽医工作进行深入的调查研究, 忽视了基层兽医管理机构在公益服务方面的特殊性, 而视同于一般性农业技术推广机构,采取“一刀切”的做法, 简单对基层站所进行撤并了事, 致使大量兽医基础性工作无法正常开展, 动物防疫和畜产品安全隐患严重。

基层防疫组织和队伍不稳, 经费得不到保障,防疫工作的机制问题没有解决,使动物防疫的基础受到动摇。3、缺乏专业人才与技术(1)、技术人员年龄结构偏大据统计在我国县乡畜牧兽医技术推广服务体系中,年龄在35岁以下的占28%,36-45岁的占31%,46-60岁的占41%,年龄结构趋于老化。

(2)、技术人员知识老化我国一些基层的兽医工作者,很多没有经过专业学校系统培训。而从畜牧专业学校毕业的人员,多数在县级和较大的乡镇工作,由于缺乏进修和技术更新,知识严重老化。

目前,乡镇防疫技术力量薄弱,很难承担繁重的疫病防治工作任务,堵、防、检、控等综合措施的落实,缺乏应有的人员和技术支撑。4、没有完善的法律体系保障到目前为止,我国在法律法规方面虽制定了《动物防疫法》、《进出境动植物检疫法》及其实施条例、《兽药管理条例》和《饲料和饲料添加剂管理条例》,但没有形成完整的兽医工作法律体系: 缺少一个兽医工作的基本法,在兽医管理体制、执业兽医管理、突发重大动物疫情的应急、动物诊疗、畜产品卫生质量等方面也没有立法; 已有的法在很多方面还很不完善, 或多或少存在一些问题,相互间还有许多不协调的地方;《动物防疫法》仅适用于对动物传染病、寄生虫病的管理,没有体现兽医管理部门对动物及其产品生产的全过程卫生监督和对兽医工作的有效管理, 其实用地位尚待提升;《动物防疫法》和《进出境动植物检疫法》在职能界定上有的地方出现交叉,有的地方又出现脱节, 很不适应当前形势下动物防检疫工作的开展和动物疫病的控制等。

三、我国兽医管理体制改革的建议机构不健全、基层动物防疫体系薄弱,缺乏专业人才,法律不完善、等问题,严重影响了动物疫病防治能力和动物产品质量安全水平的提高。加之目前国际上特别是我周边国家重大动物疫病时有发生,甚至出现局部蔓延,对我国防控重大动物疫病形成较大压力。

因此,改革兽医管理体制已经成为当前十分紧迫的任务。1、建立健全兽医工作体系建立健全兽医行政管理机构。

中央一级兽医行政管理机构列入农业部的内设机构。省以下兽医行政管理机构由省级人民政府结合本地养殖业发展情况和兽医工作需要确定,并按程序报批。

上级兽医行政管理机构对下级兽医行政管理机构负有指导职责;各级兽医行政管理机构对动物防疫、检疫工作负有指导和监督职责。要加强兽医医政、药。

8.我是学动物医学的,现在要准备毕业论文,哪里有好的动物医学毕业论

动物医学毕业论文有许多课题,下面我们为你整理的动物医学毕业论文课目是Real-time qPCR检测鸡胚中贝氏隐孢子虫方法研究。以下就是动物医学毕业论文完整内容:

摘要:为检测鸡胚中贝氏隐孢子虫,本研究根据GenBank公布的贝氏隐孢子虫和原鸡18S rRNA基因序列设计针对贝氏隐孢子虫的特异性引物,并以标准基因组DNA为模板,建立贝氏隐孢子虫SYBR Green实时荧光定量PCR(Real-time qPCR)方法,并对含有贝氏隐孢子虫的鸡胚尿囊液样品进行检测。结果表明,建立的SYBR Green Real-time qPCR方法可特异性扩增出贝氏隐孢子虫,而且建立的标准曲线线性关系良好(R2=0.998)。进一步做重复性结果显示试验重现性较好。本研究建立了快速、特异的定量检测鸡胚中贝氏隐孢子虫Real-time qPCR方法,可用于对贝氏隐孢子虫在鸡胚中繁殖规律分析和药物筛选评估。

关键词:Real-time qPCR;贝氏隐孢子虫;鸡胚

隐孢子虫(Cryptosporidium)是寄生于人和动物胃肠道和呼吸道上皮细胞内能引起人畜共患隐孢子虫病(cryptosporidiosis)的一种原虫[1]。现今,包括中国在内,在世界6大洲90个国家300多个地区已发现隐孢子虫,其能感染包括人在内的240多种动物[2]。对于免疫功能正常宿主,其主要引起自限性腹泻。对于免疫抑制患者,尤其是获得性免疫缺陷综合症(AIDS)患者,感染后危害严重,且常常引起死亡[3]。

贝氏隐孢子虫(C. baileyi)为感染鸡的优势种,主要寄生于鸡喉头、气管、法氏囊和泄殖腔等部位,可引起雏鸡呼吸道症状,导致生产性能下降甚至死亡;当与其它免疫抑制性病原混合感染时,将造成更严重的经济损失[4]。世界上大多数国家均有鸡隐孢子虫病的报道,美国乔治亚州蛋鸡群感染率为10%~60%,肉鸡群为41%;苏格兰鸡群感染率为88%[5]。在我国,不同地域报道的鸡隐孢子虫感染率差异较大,宁夏、上海、湖南、合肥、河南等地感染率分别为27%、12.1%、36.81%、50.83%、11.40%[6]。鉴于隐孢子虫病对人类健康和畜牧业生产的巨大危害,自上世纪八十年代以来隐孢子虫病研究日益成为全球范围内人兽共患病领域内的一个研究热点。人们在隐孢子虫分类地位、种类鉴定、分子流行病学、传播机制、免疫机理、检测技术和药物防治等方面进行了大量的探索性研究,取得了丰硕的研究成果[7]。

目前,隐孢子虫虫定量分析常用方法包括:定量PCR(real-time quantitative PCR,real-time q-PCR)、显微镜计数法(计数显微镜下每个视野中荧光标记或其它化学方法染色虫体)、酶联免疫吸附分析(ELISA)、光化学免疫分析和原位杂交比色法等[8-9]。其中Real-time qPCR不需要对产物进行电泳和密度测定,更多医学论文在 分析快速,且灵敏度高,重现性好,为目前最常用的定量分析方法。本研究利用实验室已建立的C.baileyi鸡胚培养模型,采用Real-time qPCR方法检测鸡胚尿囊液中C. baileyi,以期建立快速准确检测鸡胚中C. baileyi的方法,为利用C. baileyi鸡胚培养模型进行隐孢子虫药物筛选提供定量方法。

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