1.寄生虫病病原学检查技术有哪些
寄生虫学诊断技术包括病原检查、免疫学检查和分子生物学检查等三个方面。本节将
主要对病原检查的各种技术方法作一较全面的介绍
第一节
粪便检查
粪便检查是诊断寄生虫病常用的病原学检测方法。
要取得准确的结果,
粪便必须新鲜,
送检时间一般不宜超过
24
小时。
如检查肠内原虫滋养体,
最好立即检查,
或暂时保存在
35
°
C
~
37
°
C
条件下待查。盛粪便的容器须洁净、干燥,并防止污染;粪便不可混入尿液及其
它体液等,以免影响检查结果。具体方法如下:
(一)直接涂片法(
direct smear method
)
用以检查蠕虫卵、
原虫的包囊和滋养体。
方法简便,
连续作
3
次涂片,
可以提高检出率。
1
.蠕虫卵检查
滴一滴生理盐水于洁净的载玻片上,用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的
粪便块,
在生理盐水中涂抹均匀;
涂片的厚度以透过玻片隐约可辨认书上的字迹为宜。
一般
在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。应注意虫卵与粪便中的异物鉴别。虫卵都具
有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有的色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
2.猪粪便虫卵检聋的主要方法有哪些
直接涂片检查法这是最简便和常用的检查方法,如果猪 体内寄生虫数量少而粪便中虫卵也少时,有时查不出虫卵,可采用该方法。
此方法是在载玻片上滴一些甘油和水的等量混合液,再用牙签 挑取少量粪便加人其中,混合均匀,用消毒镊子夹去较大的或过多 的粪渣,最后使载玻片上留有一层均匀的粪液,对浓度的要求是将 此载玻片放于报纸上,能通过粪便液膜模糊地辨认载玻片下的字迹 为合适。在粪膜上覆以盖玻片,移置低倍显微镜下检査。
检查时,应有序地査遍盖玻片下的所有部分。
3.畜禽粪便的线虫幼虫检查法是什么
幼虫检查法主要用于正确 诊断某些蠕虫病,如诊断各种家畜的肺虫病(肺丝虫)等。
具体的 做法是:从直肠采取粪便15〜20克,放于10〜15厘米漏斗的金属 网上,漏斗下端用短胶管接小试管并固定于漏斗架上。然后,沿漏 斗边沿加入40°C温水(浸过粪球为止),静置1〜3小时,幼虫便从 粪便中游出,沉至水底小试管中。
拔下小试管,直接镜检底部的沉 淀物;也可以将几个粪球放人盛有少量温水(40°C)的平皿中,经 过5〜10分钟,除去粪球,直接用低倍显微镜检查平皿中液体,看 有无幼虫存在。此法还可用于检查畜体各器官和组织中的或伺草和 土壤中的线虫幼虫。
曰本血吸虫粪便毛蚴孵化法由于日本血吸虫寄生部位的特殊 性和生物学上的特点,一般的粪便检查法检出率很低。 本法是依据 血吸虫卵内的毛蚴在适宜条件下能很快孵出,并游动于水表面下的 特点而设计的。
取牛粪250〜500克(羊粪取一次排出量),采用水洗沉淀法取 得粪渣,装于500毫升的三角烧瓶中,注满水后静置在22°C〜26°C 处孵化,第1、第3、第5小时各观察1次,每次每个样品的观察时 间在2分钟以上,应在光线明亮处衬以黑色背景用肉眼观察。 毛蚴 往往在距水面4厘米的范围内活动,呈灰白色,折光强,梭形,并 多呈与水面平行或斜向的直线运动。
注意事项: ①粪便要新鲜,避免污染,防止冰冻和日晒。为了 提高检出率,必须做到三送六检(即连送3天粪便,检测6个样 品)。
②如用自来水,应在盛具中放置过夜脱氯后使用。 如用河水、池水、井水,应选用未经工业废水、化肥、农药污染且氢离子浓度 为63。
09〜158。5毫摩尔/升(pH值6。
8〜7。2)的水,并需加温 80°C以上,以杀死水中小生物,避免与毛蚴混淆。
③当水温在15°C 以上时,第一次换水后应改用1%〜1。 2%的盐水,以抑制毛蚴过早 孵出;当水温在18°C以上时,全部洗粪和沉淀用水均应改用1%〜 1。
2%的盐水。但是,孵化用水应为淡水。
4.寄生虫的虫卵及幼虫检查要怎么做正确
猫寄生虫的虫卵检查主要采用涂片检卵法、沉淀集卵法、漂浮集卵法。
检查幼虫常采用贝尔曼法(1)涂片检卵法先取50%甘油水溶液或普通水1~23载玻片上,然后用牙签挑取少M病猫的新鲜粪便于玻片上/匀涂片,立即加染色液,并于酒精灯上微加热至出现蒸汽,立即水洗,再置50%、70%酒精中各30秒钟,再转人35%、100%乙醇中各15分钟,之后用二甲苯透明1分钟,用中性树胶封片,镜检。 本法适用于肠道原虫检测,如猫蛔虫卵以及肺毛丝虫卵、肝吸虫卵的检查。
染色液配制法:醋酮50毫升,冰醋酸50毫升,甲醛10毫升,肖定氏液890毫升,混合后加人酸性复红1。25克,快绿(FCF)O。
5克,待溶解后装棕色玻璃中备用。(2)沉淀集卵法分为自然沉淀集卵法和离心沉淀集卵法。
自然沉淀集卵法:取病猫新鲜粪便,大小如鸽蛋,置容器内,加人10~20倍清水,用玻棒搅拌均匀,静置1~2分钟后取上部液体,弃沉渣,再加清水混匀静置30~60分钟,然后缓慢倾去上部一半液体,再加清水混匀,静置30分钟后倾去上部液体,直至液体透明为止。 最后弃上清液,吸取底部沉淀物涂片、镜检虫卵。
有条件时,粪便做成悬浮液,经40~60孔/2。54厘米的铜筛滤去大块物质,再反复沉淀后吸取沉淀物制片,镜检虫卵。
离心沉淀集卵法:取病猫新鲜粪便1~2克置试管中,加5倍水制成悬浮液,经40孔/2。54厘米的铜筛过滤,置离心管中,以每分钟800转离心4分钟,弃上清液,将沉淀物置玻片上制片,镜检虫卵。
当猫被肝吸虫、颚口线虫感染时,其虫卵检查可采用此法。(3)漂浮集卵法漂浮液种类较多,常用的为饱和食盐水溶液(1升水中加食盐400克)。
具体操作方法为:取病猫新鲜粪便5~10克,置200毫升烧杯中,加人少量漂浮液(饱和食盐水等)搅拌混匀后,再加人约20倍的饱和食盐水,搅拌后用金属纱或纱布滤去粪揸,静置30~60分钟。 用直径0。
5~1。0厘米的金属圈蘸取表面液膜,抖落于载玻片上,加盖玻片后待检。
猫的大部分寄生虫病都可用此法检验虫卵,如蛔虫、钩虫、肺毛=丝虫、颚口线虫、绦虫、球虫及弓形虫等。f贝尔曼法又称漏斗幼虫分离法。
用一根长约20厘米的乳胶管,一端与漏斗(直径10~15厘米)连接,另一端接一玻璃试管,漏斗内放置铜丝筛或纱布。 取病猫新鲜粪便15~20克,平铺于漏斗内,注人40摄氏度温水,直至全部淹没粪便为止,置室温中静置1~2小时。
幼虫因水和温度的关系,游走于水中而沉淀到玻璃试管底,弃上清液,取沉淀物置玻片上,立即镜检,可见活动的幼虫。猫的圆线虫感染可用此法检验。
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