众文网1.我想写一篇关于大肠杆菌的论文,字数1500左右,应该从那些方面入手
0引言 脆性X综合征（fragile X syndrome, FXS）是一种最常见的遗传性智力发育不全综合征，有超过99%的FXS是由脆性X智障基因1(fragile X mental retardation, FMR1)中5′端非编码区CGG三核苷酸重复序列不稳定扩增及其CpG岛异常甲基化导致. FMR1基因的表达产物FMRP的缺乏导致FXS的发生[1-2]. 本实验对编码基因存在于3号染色体[3]，能与FMR1 基因5′ز d (CGG)nز3′重复序列特异性结合的蛋白CGGBP1进行原核表达，并对其DNA结合活性进行研究. 1材料和方法 1.1材料 大肠杆菌DH5α， BL21( DE3)和表达载体pRSET A均为本实验室保存. 质粒提取试剂盒购自Sigma公司； 限制性内切酶BamH I和KpnI购自宝生物工程公司；T4 DNA连接酶购自Promega公司； Ni2+زNTA金属螯合蛋白质纯化系统购自Qiagen公司；链酶亲和素磁珠购自Dynal公司；低分子质量蛋白标准购自上海西巴斯生物技术有限公司. 1.2方法 1.2.1表达载体的构建 根据CGGBP1基因起始密码子和终止子邻近序列设计PCR引物：CGGBP1F CGC GGA TCC GAG CGA TTG TAG TAA CAG CA,CGGBP1R GGG GTA CCT CAA CAA TCT TGT GAG TTG AG. 其上游及下游引物分别加入BamHI和KpnI酶切识别位点序列（引物序列下划线部分）. PCR反应以人淋巴细胞cDNA文库为模板，扩增编码CGGBP1的基因序列. 设计PCR扩增体系25 μL，灭菌去离子水10 μL,10*反应缓冲液2.5 μL,25 mmol/L MgCl2 2.0 μL,DMSO 2.5 μL,4* dNTP混合物（每种2.5 mmol/L）2 μL,CGGBP1F和CGGBP1R各10 pmol，模板3.5 μL(50 ng/μL), Taq DNA(5 μ/μL)聚合酶0.5 μL. 扩增条件：95℃预变性5 min，再94℃ 30 s, 53℃ 1 min,72℃ 1 min循环40次，最后72℃终末延伸产物10 min. PCR产物经琼脂糖电泳分离，用胶回试剂盒回收目的基因. 用BamHI和KpnI酶切PCR产物和pRSET A，酶切产物电泳后回收，在T4连接酶作用下，目的片段定向克隆至pRSET A的BamHI和KpnI克隆位点. 将重组质粒转入大肠杆菌DH5α，接种到含氨苄青霉素的LB培养基平板并挑取单菌落. 1.2.2融合蛋白的诱导表达 将测序正确的重组质粒转入BL21( DE3). 挑取携带目标质粒的单菌落接种于含100 mg/L氨苄青霉素的LB培养基中， 37℃振荡培养12 h， 按10 mL/L比例转接于新鲜培养基，37℃振荡培养至对数生长期时，加入IPTG至终浓度1 mmol/L,32℃诱导振荡培养4 h，离心收集菌体，SDSزPAGE分析重组蛋白的表达. 1.2.3蛋白表达形式的分析 取5 mL菌液离心，用500 μL的裂解液（10 mmol/L 咪唑，300 mmol/L NaCl及50 mmol/L磷酸二氢钠 pH 8.0）重悬，加溶菌酶至终浓度为1 mg/mL，冰浴30 min，超声波裂菌，离心后分别将上清和沉淀进行SDSزPAGE分析. 1.2.4融合蛋白的纯化 将1 mL 500 mL/L Ni2+زNTA悬液和4 mL细菌裂解上清液轻轻混匀4℃放置60 min，直接过柱. 过柱结束后，用4 mL漂洗液（20 mmol/L 咪唑，300 mmol/L NaCl及50 mmol/L 磷酸二氢钠 pH 8.0），洗脱未和Ni珠结合的杂蛋白. 经过2次漂洗后再用0.5 mL洗脱液（250 mmol/L 咪唑，300 mmol/L NaCl及50 mmol/L 磷酸二氢钠 pH 8.0） 3次洗脱特异结合的目的蛋白，分步收集. 取收集液，进行SDSزPAGE分析. 1.2.5CGGBP1与（CGG）29重复序列双链DNA结合 实验取10 μL磁珠用1 mL的无RNA酶的三蒸水清洗磁珠2次，除去防腐剂. 1*生物素亲和素结合缓冲液（10 mmol/L TrisزHCl,2 mol/L NaCl,1 mmol/L EDTA,1 g/L Tween 20）15 μL重悬磁珠，各5 μL分3组实验. 其中一组加入25 μL(100 ng/μL)生物素化的（CGG）29重复序列双链DNA，另外两组分别加入25 μL(100 ng/μL)非生物素化的（CGG）29重复序列双链DNA和25 μL三蒸水做对照；三组分别再加入2*生物素亲和素结合缓冲液30 μL,25℃轻摇1 h. 经磁力吸附后，弃上清. 重复上述步骤3次；加入纯化后CGGBP1(500 μg/mL)15 μL 和2*核酸蛋白结合缓冲液（20 mmol/L HEPES,100 mmol/L NaCl,0.5 mmol/L DTT,100 g/L甘油）20 μL，室温下静置30 min；经磁力吸附后，弃上清；用1*核酸蛋白结合缓冲液清洗磁珠2次；加三蒸水10 μL，沸水煮10 min，进行SDSزPAGE分析. 2结果 2.1原核表达载体的构建及鉴定 扩增产物在15 g/L的琼脂糖凝胶电泳，可观察到一条约504 bp的条带（图1）； 重组质粒pRSET A/CGGBP1及质粒pRSET A分别用BamHI和KpnI酶切，pRSET A/CGGBP1分为两个片段，分别为2.9 ku和504 bp（图2），均与预计结果相同. 2.2CGGBP1的表达 用BamHI和KpnI双酶切pRSET A/CGGBP1表达质粒，筛选阳性重组质粒. 携带有pRSET A/CGGBP1质粒的E.coli BL21(DE3)菌株，经IPTG诱导后，在Mr 约25 000处出现1条表达条带；而未经IPTG诱导的菌体则无此条带. 诱导后的菌体经溶菌酶及超声波裂解，离心后分为上清和沉淀两部分. 经SDSزPAGE分析表明，CGGBP1部分存在于细菌裂解液的上清中，为可溶性蛋白，上清液中的目标蛋白相对较少（图3）. 2.3CGGBP1蛋白纯化 在表达质粒pRSET A多克隆酶切位点的上游， 插入有连续6个组氨酸的序列 —（His ）6 tag. 重组质粒经诱导表达后，（His ）6 tag可以和外源插入片段共同表达. 利。
2.大肠杆菌耐药影响因素研究为题目的论文怎么写,开题报告又怎么写
一、开题报告的含义与作用 课题负责人在调查研究的基础上撰写的报请上级批准的选题计划。它主要说明这个课题应该进行研究，自己有条件进行研究以及准备如何开展研究等问题，也可以说是对课题的论证和设计。开题报告是提高选题质量和水平的重要环节。 研究方案，就是课题确定之后，研究人员在正式开展研之前制订的整个课题研究的工作计划，它初步规定了课题研究各方面的具体内容和步骤。研究方案对整个研究工作的顺利开展起着关键的作用，尤其是对于我们科研经验较少的人来讲，一个好的方案，可以使我们避免无从下手，或者进行一段时间后不知道下一步干什么的情况，保证整个研究工作有条不紊地进行。可以说，研究方案水平的高低，是一个课题质量与水平的重要反映。二、写好研究方案应做的基础性工作 写好研究方案一方面要了解它们的基本结构与写法，但“汝果欲学诗，功夫在诗外”，写好开题报告和研究方案重要还是要做好很多基础性工作。首先，我们要了解别人在这一领域研究的基本情况，研究工作最根本的特点就是要有创造性，熟悉了别人在这方面的研究情况，我们才不会在别人已经研究很多、很成熟的情况下，重复别人走过的路，而会站在别人研究的基础上，从事更高层次、更有价值的东西去研究；其次，我们要掌握与我们课题相关的基础理论知识，理论基础扎实，研究工作才能有一个坚实的基础，否则，没有理论基础，你就很难研究深入进去，很难有真正的创造。因此，我们进行科学研究，一定要多方面地收集资料，要加强理论学习，这样我们写报告和方案的时候，才能更有把握一些，制定出的报告和方案才能更科学、更完善。 三、课题研究方案的结构与写法 课题研究方案主要包括以下几个方面： （一）课题名称 课题名称就是课题的名字。这看起来是个小问题，但实际上很多人写课题名称时，往往写的不准确、不恰当，从而影响整个课题的形象与质量。这就是平常人们所说的“只会生孩子，不会起名字”。那么，如何给课题起名称呢？ 第一，名称要准确、规范。 准确就是课题的名称要把课题研究的问题是什么，研究的对象是什么交待清楚，课题的名称一定要和研究的内容相一致，不能太大，也不能太小，要准确地把你研究的对象、问题概括出来。 规范就是所用的词语、句型要规范、科学，似是而非的词不能用，口号式、结论式的句型不要用。因为我们是在进行科学研究，要用科学的、规范的语言去表述我们的思想和观点。课题就是我们要解决的问题，这个问题正在探讨，正开始研究，不能有结论性的口气。 第二，名称要简洁，不能太长。 不管是论文或者课题，名称都不能太长，能不要的字就尽量不要，一般不要超过20个字。这次各个学校课题申报表中，我看名称都比较简洁，我就不再多说了。 （二）课题研究的目的、意义 研究的目的、意义也就是为什么要研究、（三）本课题国内外研究的历史和现状（文献综述）。 规范些应该有，如果是小课题可以省略。 四、注意三点： 1、要学会搜集和获取信息。处处留心皆学问（积累）。 2、要多学习，多借鉴。集思广益开眼界（学习与借鉴）。 3、创新。登高望远多创意（创新）。本文来自： 专业毕业设计网（） 详细出处参考： 更多毕业设计，毕业论文知识，请登陆 察看
3.关于医学检验本科毕业论文的题目有哪些
网上很多题目，都不是原创，最好别用。
之前也是网上down的一篇，老师直接说不行。还是后来学长给的雅文网，写的《大肠杆菌检验方法的探究与分析》，十分专业。
看下参考文献吧 [1] 毕玲玲1，孙成春2，公衍文3，张欣悦1，安小通1. 黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌临床分布和耐药表型分析[J]. 军医进修学院学报. [2] 熊燕，张虹，陈炎添，容永璋. 社区和医院获得性血流感染的病原菌分布及感染途径调查[J]. 检验医学. 2014(10) [3] 于霞，尚媛媛，赵立平，董玲玲，马异峰，王晓波，黄海荣. 分子杂交法快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的初步评价[J]. 检验医学. 2014(10) [4] 张景皓，王家路，赵虎. 新疆汉族与维吾尔族HBV耐药变异类型与基因型研究[J]. 检验医学. 2014(10) [5] 张津萍，尤永燕，沙仲，张瑞丽，王千秋. FQ-PCR与血清型特异性抗体法检测HSV-2的临床意义[J]. 检验医学. 2014(10) [6] 赵付菊，赵虎. 染色体介导AmpC β-内酰胺酶表达的分子调控机制的研究进展[J]. 检验医学. 2014(10) [7] 乔昀，赵英妹，仲俊，张珏，龚捷文. 实时荧光定量PCR在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中的评价与应用[J]. 检验医学. 2014(07) [8] 刘锦燕，倪培华，。 网上很多题目，都不是原创，最好别用。
之前也是网上down的一篇，老师直接说不行。还是后来学长给的雅文网，写的《大肠杆菌检验方法的探究与分析》，十分专业。
看下参考文献吧 [1] 毕玲玲1，孙成春2，公衍文3，张欣悦1，安小通1. 黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌临床分布和耐药表型分析[J]. 军医进修学院学报. [2] 熊燕，张虹，陈炎添，容永璋. 社区和医院获得性血流感染的病原菌分布及感染途径调查[J]. 检验医学. 2014(10) [3] 于霞，尚媛媛，赵立平，董玲玲，马异峰，王晓波，黄海荣. 分子杂交法快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的初步评价[J]. 检验医学. 2014(10) [4] 张景皓，王家路，赵虎. 新疆汉族与维吾尔族HBV耐药变异类型与基因型研究[J]. 检验医学. 2014(10) [5] 张津萍，尤永燕，沙仲，张瑞丽，王千秋. FQ-PCR与血清型特异性抗体法检测HSV-2的临床意义[J]. 检验医学. 2014(10) [6] 赵付菊，赵虎. 染色体介导AmpC β-内酰胺酶表达的分子调控机制的研究进展[J]. 检验医学. 2014(10) [7] 乔昀，赵英妹，仲俊，张珏，龚捷文. 实时荧光定量PCR在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中的评价与应用[J]. 检验医学. 2014(07) [8] 刘锦燕，倪培华，史册，魏冰，项明洁. 白念珠菌14-α脱甲基酶K143Q氨基酸置换与氟康唑耐药形成的相关性研究[J]. 检验医学. 2014(07) [9] 张勇，刘爱胜，文艳. 75株碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌ERIC-PCR菌种分型及其主要耐药机制研究[J]. 检验医学. 2014(07) [10] 胡海燕，裘先前，许照美. 1株与福氏志贺菌Y变种交叉凝集的摩根摩根菌鉴定结果[J]. 浙江预防医学. 2014(10)。
4.3000 科学论文 题目 摘要 关键字 谢谢了
BOT模式在湘江水体污染治理中的应用研究摘要分析了湘江水体污染存在的问题；讨论了BOT模式在城市污水处理行业的优点；认为该模式是一种长期、稳定的投资模式，论证了湘江流域采用该模式的可行性，并提出了相关应完善的配套政策；最后得出采用BOT模式来在湘江沿岸城市修建污水处理厂是解决湘江水体污染问题有效的途径之一。
关键词水体污染治理污水处理厂BOT模式湘江1湘江水体污染现状及治理存在的问题1.1湘江水体污染现状湘江是湖南的母亲河，衡阳、株洲、湘潭、长沙、岳阳等湘江沿岸城市的居民日常生活用水直接来自湘江。但湘江水体污染极为严重，据《关于治理湘江流域的通知》所载，长沙市湘江饮用水源超标污染指标为氨氮和总大肠菌群；株洲市为氨氮和挥发性酚；湘潭市为氨氮、总大肠菌群和总汞。
近年来，郴州、衡阳、株洲、湘潭、长沙、岳阳等城市的生活污水排放量成倍增加，沿江城市有近7亿t/a生活污水直排湘江；此外，一些高浓度工业废水也排放到湘江。长沙水利枢纽建成以后，湘江水域株洲至长沙段的水位将有较大的提高，蓄水防洪能力会有很大的改善，而湘江该段的水流流速却明显的不如建成前，水体的自然净化能力将会有很大的降低，进一步加重湘江水体污染，以至湘江某些江段的饮用水水源不能完全满足地面水Ⅲ类水质标准[1]。
湘江的水体污染已经严重地影响到湘江流域沿岸人们的生活及工农业发展。1.2治理存在的问题通过对湘江水体污染现状和目前治理情况的分析，湘江水体污染治理主要存在以下几个方面的问题：1）由于湘江沿岸城市化的不断发展，城市人口不断地增加，人们生活水平不断地提高，因此城市生活污水排放量明显增加。
而湘江流域内污水处理设施很少，8个城市中仅有6座污水处理厂在运行，实际处理量约30.5万t/d，处理量约占生活污水排放总量的15%，远达不到要求的50%，未来几年内直接排放的生活污水对湘江的影响将超过工业废水的影响，因此城市污水处理厂的建设势在必行。2）湘江沿岸城市污水处理厂对项目的可行性研究不全面，风险管理与评价不合理。
有些污水处理厂项目立项多年，却迟迟的不能施工；有些项目完成后却不能投入运行，如株洲有1座污水处理厂投资上亿元，建成几年后都没有运行，出现这种现象的原因主要是在项目的可行性研究上没有考虑管理运行费用及建设污水处理厂的风险性，政府部门只注重污水处理厂的建设，而忽视了污水处理厂的管理和运行。造成了城市污水处理资金使用效率低下，因而一方面需要大规模投资兴建新的污水处理厂，而另一方面污水处理厂运行普遍不足，两者都是缺少资金。
3）湘江沿岸城市污水处理以政府行政事业化管理为主，缺乏有效的监督管理机制，缺乏有效的投入产出和成本效益核算机制，从而造成污水处理成本高，投资浪费大，并没有体现谁投资谁收益的原则，污水处理厂只是相当于政府部门的附属企业，根本不能适应污水处理产业的市场化发展趋势。4）湘江沿岸城市对待污水处理厂的问题依然停留在老观念上，也就是说重技术（工程）方法而忽视非技术（管理）方法，导致一些污水处理项目的投资效益差与不可持续性，主要表现在污水处理厂普遍不能按设计负荷运行。
5）湘江沿岸城市污水处理缺乏必要的价格调控，价格偏离价值太大，导致了污水处理企业发展后劲不足。现在的收费偏低，据有关人士预测污水处理收费要达到0.6~0.65元/t，污水处理才能真正得到资金保证。
因而，非政府资本进入城市污水处理市场的投资利润不能得到保证。2 BOT模式在污水处理行业的优点2.1 BOT模式的简介BOT模式是一种建设权与运营权相结合的方式，根据世界银行《1994年发展报告》的定义，所谓BOT(build-operate-transfer)即兴建-经营-移交，或者是BOOT模式即建设-拥有-运营-转让[2]，它是一种私营机构参与基础设施的建设和运营的方式，也是一种新型的民营资本进行基础设施建设的项目融资方式[3]。
具体做法是经营公司对项目的设计、咨询、信贷和施工实行一揽子总承包，且在项目竣工后，在特许权规定的期限内进行经营，向用户收取费用，以回收投资、偿还债务。赚取利润，达到特许权限期后，经营公司将项目无偿交给政府部门。
近年来，以BOT模式进行我国城市污水处理工程项目融资，正逐步为我国政府国内外投资者所关注[2]。2.2 BOT模式在污水处理行业的优点2.2.1城市污水处理项目新型的融资手段1)BOT项目融资是指通过项目的资产、收益作低押来融资。
其项目导向、有限追索、风险分担、信用结构多元化的特征，使项目融资的信用结构灵活多样，债务承受能力高，风险分担合理且较低，也使项目融资易获得较高的融资比例和较长的贷款周期。由于这些特点，BOT模式非常适用于一次性投资大、回收周期长、投资回报稳定风险小的城市污水处理工程项目。
2)BOT项目融资是现阶段城市污水处理的重要融资方式之一。治理湘江水体污染，保护湘江水质，必须提高湘江沿岸城市的生活污水及工业废水的处理水平。
但首先要解决建设污水处理厂的资金来源问题。BOT融资模式可以利用资本的杠杆效应，充分发挥政府。
5.毕业论文字体的格式都是什么
、毕业论文格式的写作顺序是：标题、作者班级、作者姓名、指导教师姓名、中文摘要及关键词、英文摘要及英文关键词、正文、参考文献。
2、毕业论文中附表的表头应写在表的上面，居中；论文附图的图题应写在图的下面，居中。按表、图、公式在论文中出现的先后顺序分别编号。
3、毕业论文中参考文献的书写格式严格按以下顺序：序号、作者姓名、书名（或文章名）、出版社（或期刊名）、出版或发表时间。
4、论文格式的字体：各类标题（包括“参考文献”标题）用粗宋体；作者姓名、指导教师姓名、摘要、关键词、图表名、参考文献内容用楷体；正文、图表、页眉、页脚中的文字用宋体；英文用Times New Roman字体。
5、论文格式的字号：论文题目用三号字体，居中；一级标题用四号字体；二级标题、三级标题用小四号字体；页眉、页脚用小五号字体；其它用五号字体；图、表名居中。
6、格式正文打印页码，下面居中。
7、论文打印纸张规格：A4 210*297毫米。
8、在文件选项下的页面设置选项中，“字符数/行数”选使用默认字符数；页边距设为 上：3厘米；下：2.5厘米；左：2.8厘米；右：2.8厘米；装订线：0.8厘米；装订线位置：左侧；页眉：1.8厘米；页脚1.8厘米。
9、在格式选项下的段落设置选项中，“缩进”选0厘米，“间距”选0磅，“行距”选1.5倍，“特殊格式”选（无），“调整右缩进”选项为空，“根据页面设置确定行高格线”选项为空。
10、页眉用小五号字体打印“湖北工业大学管理学院2002级XX专业学年论文”字样，并左对齐。
11、使用软件：Microsoft Word 2000以上版本。
参考资料：/special/geshi.htm
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