1.维生素AD胶丸的生产工艺,毕业论文
【药品名称】 通用名:维生素AD胶丸 曾用名: 商品名: 英文名:Vitamin A and D Capsules 汉语拼音:Weishenɡsu AD Jiɑowɑn 本品为复方制剂,其组分为:每丸含维生素A 3000单位和维生素D 300单位。
【性状】本品为胶丸,内含黄色或深黄色油状液。 【作用类别】 【药理毒理】维生素A和D是人体生长发育的必须物质,尤其对胎儿、婴幼儿的发育,上皮组织的完整性,视力,生殖器官,血钙和磷的恒定,骨骼、牙的生长发育有重要作用。
【药代动力学】 【适应症】1.治疗佝偻病和夜盲症。2.治疗小儿手足抽搐症。
3.预防维生素AD缺乏症。 【用法和用量】口服:1.成人:一次1丸,一日1~2次。
2.儿童:用量请咨询医生。 【不良反应】按推荐剂量服用,无不良反应。
【禁忌】慢性肾衰竭、高钙血症、高磷血症伴肾性佝偻病禁用。 【注意事项】应按推荐剂量适用,不可超量服用。
【孕妇及哺乳期妇女用药】1.高钙血症孕妇可伴有对维生素D敏感,功能上又能抑制甲状旁腺活动,以致婴儿有特殊面容、智力低下及患遗传性主动脉弓缩窄。2.全母乳喂养婴儿易发生维生素D缺乏,皮肤黝黑母亲婴儿尤易发生。
婴儿对维生素D敏感性个体间差异大,有些婴儿对小剂量维生素D即很敏感。3.妊娠期对维生素A需要量略增多,但每日不宜超过6000单位。
孕妇摄入大量维生素A时有可能引起胎儿畸形,如泌尿道畸形、生长迟缓、早期骨骺愈合等。维生素A能从乳汁分泌,乳母摄入增加时,应注意婴儿自母乳中摄取的维生素A量。
妊娠动物服用过量维生素A可能致胎仔中枢神经系统、脊柱、肋骨、心脏、眼及泌尿道畸形。有维生素A过量摄入,并可能合并早期妊娠者,应作妊娠试验,并测血中维生素A含量。
维生素A过量期应避孕。妊娠妇女如有维生素A摄入过量中毒,应进行有无胎儿致畸风险的咨询。
【儿童用药】婴幼儿对大量或超量维生素A较敏感,应谨慎使用。 【老年患者用药】 老年人长期服用维生素A,可能因视黄基醛廓清延迟而致维生素A过量。
【药物相互作用】 1.口服避孕药可提高血浆维生素A的浓度。2.维生素E可促进本品中维生素A的吸收,增加肝内贮存量,加速利用和降低毒性,但服用大量维生素E可耗尽维生素A在体内的贮存。
3.制酸药(如氢氧化铝)可使小肠上段胆酸减少,影响本品中维生素A的吸收。4.大量维生素A与抗凝药(如香豆素或茚满二酮衍生物)同服,可导致凝血酶原降低。
5.考来烯胺、矿物油、新霉素、硫糖铝能干扰本品中的维生素A的吸收。6.不应与含大量镁、钙的药物合用,以免引起高镁、高钙血症。
【药物过量】 长期或过量服用可产生慢性中毒,早期表现为骨关节疼痛、肿胀、皮肤瘙痒、口唇干裂、软弱、发热、头疼、呕吐、便秘、腹泻、恶心等。 【规格】 【贮藏】避光、密封,阴凉干燥处保存。
【包装】 满意请采纳。
2.北京海军总医院刘阳医生评价怎么样
刘阳,男,1965。
11出生。主任医师,教授,医学硕士,硕士研究生导师。
1989年毕业于第二军医大学,1995年毕业于军医进修学院获硕士学位,2011年11月作为访问学者赴美国南加州大学HOUSE耳科研究所学习,专业方向耳显微外科、耳神经外科。 工作期间发表各类论文、编译、综述、译著及参编著作近60篇,获军队科技进步二等奖1项,三等奖1项,现任《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》、《中华耳科学杂志》、《听力及言语疾病杂志》编委,世界卫生组织(WHO)防聋合作中心防聋专家委员会委员,中华医学会耳鼻咽喉头颈外科分会耳科组成员。
在此领域主要有影响力的论著及成就包括:传导性耳聋核心期刊系列论文30余篇;SCI论著4篇。2008年起草完成《中耳慢性感染的外科治疗》获得军队临床成果二等奖。
起草制定《中耳炎临床分类和手术分型指南(2012)解读;完成首发基金合作课题《梅尼埃病的客观诊断依据研究》;参与完成4项国家自然科学基金和首都医学发展基金。 2013年获得海军总医院归国人员科研启动基金《内淋巴积水的MRI客观定量研究》,2014年获北京市科委首都临床特色基金资助《内淋巴积水MRI客观影像临床应用研究》。
海军总医院颞骨解剖与外科技术学习班主讲教师 迄今已举办18期,学员遍布全国,产生广泛影响。 2006年以来发表论文1。
纳米生物陶瓷在听小骨重建及乳突修复中的作用 中华医学杂志2006,86(1):45-472。中耳乳突外科中自体骨粉乳突填充与外耳道成形 中国耳鼻咽喉头颈外科杂志 2006,13(7):4753。
保留骨桥的乳突鼓室成形术(IBM)远期疗效及相关技术再探讨 中华耳科学杂志 2007,5(2):1484。 胆脂瘤中耳炎的外科治疗策略 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007,42(7):483 5。
中耳乳突手术中面神经隐窝的处理策略 中华耳科学杂志 2008,6(3):2706。伴有面隐窝开放的保留骨桥式乳突鼓室成形术 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2008,43(11):806-808 7。
Technique of mobile bony island for cochlear implantation in children ORL,2009,71(4):209-211 8。耳显微外科手术解剖训练教学模式 中华耳科学杂志 2009,6(7):1819。
Otoendoscopy treatment of hidden lesions of otomastoiditis Chinese Medical Journal 2010,123(3):291-29510。Infection associated with Hydroxyapatite prosthesis and related factor Journal of otology 2010,5(1):24-2911。
中耳术后感染对羟基磷灰石人工听骨的影响 中华耳科学杂志 2010,8(3): 254-25712。慢性化脓性中耳炎患者术前颞骨CT检查对术式选择的意义 听力学与言语疾病杂志 2010。
18(3)(3):218-22113。乳突鼓室成形伴上鼓室切开重建技术治疗胆脂瘤性中耳炎 中华耳科学杂志 2010,8(3): 254-25714。
现代耳显微外科手术解剖训练教学改革与价值评估 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2010,22,1054-105515。豚鼠内耳钆喷酸葡胺MRI影象的初步探讨 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2011,46(8):669-67416。
2D、3D 影像重建对听骨链病变诊疗的评估价值 中华耳科学杂志 2011,9(3)::117。 我军海上医院船发展与海上医疗救治现状和需求 中国急救复苏与灾害医学杂志 2011,6(9):729-73318。
乳突半开放并填充术治疗胆脂瘤性中耳炎 听力学与言语疾病杂志 2013。21(1):56-5719。
中耳炎临床分类和手术分型指南(2012)解读 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013,48(1):6-1020。 Epitympanoplasty with cartilage obliteration in the preservation of posterior canal wall: a technique for surgical treatment of attic cholesteatoma Eur Arch Otorhinolaryngol。
DOI 10。1007/s00405-013-2485-1 Published online: 16。
Apr。2013 10。
1007/s00405-013 -2485-121。保留外耳道后壁上鼓室切开软骨重建术治疗中耳胆脂瘤。
听力学与言语疾病杂志 2013。 21。
3.北京同仁医院梁凤和医生评价怎么样
梁凤和,1985年毕业于白求恩医科大学,1988年获硕士学位,1996年获首都医科大学博士学位。
1988-1993年任职于大连医科大学第一医院,1996年起任职于北京同仁医院。1996-1999年间曾在汉城国立大学医院、复旦大学眼耳鼻喉医院及华沙听觉病理及生理研究所学习。
2000-2007年在美国Medical University of South Carolina从事毕业后医学工作,2007年回国后工作于北京同仁医院。主要专长中耳炎、中耳胆脂瘤的手术治疗,突发性耳聋耳鸣面神经麻痹的综合治疗。
每年完成中耳显微手术一百余例。 1996年入选北京市科技新星计划,1997年入选北京市跨世纪优秀人才计划,中华医学会耳鼻咽喉科学会第六届委员会(1996-2001)中青年委员。
共发表SCI收录论文9篇,其中6篇为第一或通讯作者,一篇为Pflügers Archiv - European Journal of Physiology杂志封面论文。 Selected Publications:1。
Mutational analysis of the SLC26A4 gene in Chinese sporadic nonsyndromic hearing-impaired children。 Int J Pediatr Otorhinolaryngol。
2012 Oct 76(10):1474-80。 2。
Microarray-based mutation detection of pediatric sporadic nonsyndromic hearing loss in China。 Int J Pediatr Otorhinolaryngol。
2012 Feb 76(2):235-9。3。
Inhibition of the Calcium- and Voltage-dependent Big conductance Potassium Channel Ameliorates Cisplatin-induced Apoptosis in the Spiral Ligament Fibrocytes of the Cochlea。 Neuroscience 2005 135:263-271。
4。 Identification and Characterization of an L-type Cav 1。
2 channel in spiral ligament fibrocytes of gerbil inner ear。 Brain Research Molecular Brain Research 2004 125: 40-46。
5。 A voltage- and Ca2+-dependent big conductance K channel in cochlear spiral ligament fibrocytes。
Pflugers Arch。 (European Journal of Physiology) 2003 Mar 445(6):683-92。
6。 Otoacoustic emission and auditory efferent function testing in patients with sensori-neural hearing loss。
Chin Med J (Engl)。 1997 Feb 110(2):139-41。
7。 听觉神经病 中华耳鼻咽喉科杂志 1999, 34:350-352。
4.迪亚特洛夫事件是真的吗
54年前的2月份,乌拉尔地区发生了近代史上最奇怪的谜案,至今都悬而未决。
从表面上看,人们熟知的迪亚特罗夫死亡事件是非常容易解释的:在零下三十度的恶劣环境中,由十个滑雪者组成的小组艰难前进,最终九个人不幸丧生。但是根据当时队员日记以及苏联调查者记录得到的一些细节,却令人毛骨悚然:1959年2月2日的晚上,这个小组的成员们从里面将帐篷割开,只穿着睡觉时的衣服就消失在了冰原上。
三个星期之后,在离帐篷几百米的一个斜坡下发现了五具队员的尸体。又经过了两个月的搜索,调查者才找到了另外四具尸体,奇怪的是他们都穿着或多或少穿着之前死掉同伴的衣服。
除此之外,他们中有的有非常严重的内伤,包括头骨破裂,肋骨骨折。当时的调查者报告称没有证据说明这是谋杀,然后马上结束了这个案子。
这个小组是由一些学生和乌拉尔科技大学的毕业生组成的,他们所有人都有野外旅行探险的经验。这次旅行是由23岁的依戈.迪亚特罗夫组织的,计划在位于乌拉尔地区北部的Otorten山脉探险,将于1959年1月28日开始。
于睿.于丁是这次探险中唯一的幸存者,因为他在到达荒野之前生病了所以不得不留在了一个村子里。其他九个人继续跋涉前进。
从后来调查者发现的胶卷洗出的照片可以看到,迪亚特罗夫和队员们在2月2号的傍晚在靠近Ortoten一座山的山坡上搭建帐篷。 那座山被当地土生土长的曼西部落称为” Kholat Syakhl“,意思是”死亡之山“。
尽管如此,我还是对这种令人毛骨悚然的传说半信半疑。不过,他们选择在山坡搭建帐篷似乎也说明了一点问题。
报道称他们离森林大概只有一米(1米有点太近了,此处原文大概有问题),在那边搭帐篷至少在零度以下的情况下能有点遮蔽。从照片他们看他们并不赶时间,所以选择在山坡宿营而不是在靠近森林的地方的确是疑点重重,虽然也不是完全说不过去。
”迪亚特罗夫可能不想走回头路,或者是他决定在实战演练山坡扎营“。于丁在圣彼得堡时报2008年的采访中这样说道。
那大概是这个小队伍的最后一个帐篷。迪亚特罗夫之前曾经说过小组预计在2月12号返回,但也有可能会晚一点。
直到20号人们才觉得事情不对劲,26号搜救的志愿者和救援队伍找到了探险队的帐篷。 当政府派出的的调查组到达时,他们发现帐篷是从里面被割开的,还有八个或者九个人离开帐篷向山脚下森林行进的脚印。
据调查组说,探险队没有穿鞋也没有带工具,从脚印分析一些队员光着脚或者仅仅穿着袜子。换句话来说,这些队员们在某种特别紧急的情况下割碎了帐篷跑了出来,虽然外面的积雪已经有齐腰那么深。
而且,周围并没有发现其他人的踪迹或者探险队成员之间有谋杀行为。 最先被发现的两具尸体在森林附近的一颗大松树下。
之前曾经提过森林离帐篷只有一米远,调查组发现脚印在离那里大概还有三分之一的时候没有了,当然也有可能是调查组在还没有抵达的三个星期里天气的原因。这两具被发现的尸体只是穿了内衣,光着脚。
根据报告,这棵树高处有被折断的树枝,这说明曾经有人试着爬上树。另外旁边还有火堆的余烬。
另外三具包含迪亚特洛夫在内的尸体在帐篷和这颗大树之间被发现,从尸体的姿势看他们明显是要返回帐篷。其中的一员,Rustem Slobodin,头骨破裂,但是医生说那并不是致命伤。
关于谋杀的调查也在医生声明者五人是由于低温二导致死亡之后随之结束。 直到两个月之后,剩余的四具尸体才在离大树几百米远的下坡的一个山谷中被找到,而且都被几十米的积雪掩埋。
之前发现的五具尸体的种种疑点暂且不谈,这次的四具尸体才是真正让人倒吸一口凉气。四个人全部惨死于外伤,虽然外表并没有非常明显的伤口。
其中一员,Nicolas Thibeaux-Brignollel,同样头骨碎裂。 Ludmila Dubinina,肋骨骨折,而且舌头也不翼而飞! 当时有可能是这个小队伍正在寻求救助,然后掉进了山沟。
但是这解释不了Dubinina不翼而飞的舌头。当时有些人怀疑是这个小队伍遭到了曼西部落的攻击,但是验尸官指出这些伤不是人类能造成的,尤其是考虑到并没有外在的一些伤口。
根据时代周刊查阅的一些没有封存的资料,当时在场的医生之一Boris Vozrozhdenny说”这相当于一场车祸能造成的后果“。 这件事变的越来越奇怪。
最后发现的四具尸体比前面先发现的五具尸体衣着整齐一些,而且显然他们穿上了死者身上的衣服继续他们漫无目的的跋涉。 比如说Zolotariov,他穿着Dubinina的衣服和帽子,而Dubinina的脚上裹着松树下其中一个死者的毛裤子。
更神秘的是,经过测试,最后发现的五具尸体身上的衣服都有放射性元素。 这些放射性元素无从解释,但是对这个谜案的其他部分的解释比那些外星人或者核试验的解释可信多了。
据报道,处在低温或者昏迷状态下可能会导致伤者”精神错乱脱衣“。这个惨案最有可能的解释就是这个小队伍的帐篷被雪崩埋了,所以帐篷才被割开还造成了一些队员受伤。
不管这个队伍被埋了多长时间,他们可能受到低温折磨然后没有带任何工具就离开帐篷寻求帮助。同时,五个队员是死于冻伤,这一假设还是非常可信的。
但是发现的放射性物质真的是无从解释。
5.上海新华医院杨军医生评价怎么样
杨主任: Hello,我是来自上海理工大学的患者,左耳鼓室成形术已经过去了1个月11天,自从去您那复诊之后,感觉左耳正在慢慢恢复,比术前有了很大好转! 6月是毕业的季节,是朋友们各奔天涯的季节,同时也是收获的季节,对于我来说,大学四年收获过爱情,友情,也考取了理想大学的研究生,未来即将翻开崭新的一页,但是,最大的收获也是我最感激的收获就是遇到了您,您治好了一直困扰了我二十多年的双侧慢性中耳炎,现在听力也有一定的提升,生活质量也提高了很多! 记得那时候是大二的暑假,我跑了上海的很多医院,医生的诊断结果都是一样,双耳慢性中耳炎伴流脓流水二十余年,听力已经下降了很多,那时候还佩戴着助听器,对我日常生活和上课都有影响,也有医生告诉我说,如果这种情况持续下去会有失去讲话能力的可能。
经过和家人的商量,我坚定了动手术的信念,但无法决定找哪个医生,辗转中一个医生推荐我来新华医院,并指出新华医院的杨军主任是这方面的权威专家,那一刻我就下定决心,一定要找您做这个鼓室成形术! 当时一直挂不上您的号,无奈之下挂了和您同一时间出诊的隔壁诊室朱雪敏的号,我想您病人那么多,应该都是像我一样慕名前来的,当天我预约了在您那做手术,然后朱医生带我去见您,您认真细致的帮我检查,看了我鼓室是否干燥,是否适宜动手术,还问了我病史,非常耐心,非常专业,并决定先做右耳的鼓室成形术,那一刻,我终于安心下来,终于可以摆脱助听器了! 等了两周不到,就接到电话通知我入院,手术前您还给我父母亲详细讲解了手术,您那坚定的语气也让他们安心了不少,让我们知道鼓室成形术对您来说就是个小手术,不用太担心!您对每一位病人都是那么细心和耐心,不对任何人另眼相看,不嫌麻烦地一次又一次地询问我的感受、仔细诊断,还详细地把病情的进展解释给我们听,叮嘱我们平时注意事项,让我们感到亲切温暖。 手术后您和组里的医生每天早晚都来查房,询问我每天的恢复情况,叮嘱我多吃点,这样才好得快!果然住院期间一天比一天轻松,一周就能出院了!出院后按时去您那里复诊,我明显感觉右耳听力有好转,没动手术前必须要依靠助听器才能听清别人讲话的我,手术后就彻底摆脱助听器了! 大四上学期班里有个同学也是鼓膜大穿孔,知道我在新华医院动过手术,特意来问我的意见,我当时就推荐她去您那里做手术,她手术后恢复的也很好,后来又推荐她的亲人去您那看病!我想,您医术这么高超,好口碑一定就是这样口口相传而广而告之的吧! 真是太感谢您和您组里的医护人员,感谢您们的细心照顾,精湛医术,崇高医德,感谢您们给患者带来了新的希望! 经过一年多的休整,我在今年5月又去您诊室预约左耳的鼓室成形术,这一次因为6月就要毕业,所以时间很紧,必须赶在毕业论文答辩之前出院,当时很担心会来不及,但您听说了之后肯定的跟我说“来得及的,没问题!”果然,这一次的手术很是轻松,也没怎么感觉疼,身体恢复的很快,我想这与您精湛的医术是分不开的! 不知不觉写了这么多,有点啰嗦了,但这些真的是我想对您和您小组里的成员表达我深深地感激之情,感谢您治好我的病,您为我看病是我最幸运的事,我真的太感谢您了,谢谢!!!!! 您让我对美好的生活充满新的希望,我发自肺腑地向您表示最衷心的谢意和崇高的敬意。
谢谢您,杨主任! 我也感谢新华医院有这样处处为病人着想、医术高明、医德高尚的好医生们!您们是所有医生的好榜样! 最后衷心的祝愿您们工作顺利,保重身体!谢谢您们,辛苦了! Thank you so much! 2013-6-20。
6.汽车检测与维修技术毕业论文结束语怎么写
本论文在xxx导师的悉心指导下完成的。
导师渊博的专业知识、严谨的治学态度,精益求精的工作作风,诲人不倦的高尚师德,严于律己、宽以待人的崇高风范,朴实无法、平易近人的人格魅力对本人影响深远。不仅使本人树立了远大的学习目标、掌握了基本的研究方法,还使本人明白了许多为人处事的道理。
本次论文从选题到完成,每一步都是在导师的悉心指导下完成的,倾注了导师大量的心血。在此,谨向导师表示崇高的敬意和衷心的感谢!在写论文的过程中,遇到了很多的问题,在老师的耐心指导下,问题都得以解决。
所以在此,再次对老师道一声:老师,谢谢您。
7.有关ECAP的论文
联合应用卡那霉素和速尿的豚鼠耳蜗毒性实验观察 【摘要】 目的 探讨卡那霉素和速尿联合用药对豚鼠耳蜗的毒性作用。
方法 实验组25只豚鼠先行肌肉注射卡那霉素500 mg/kg,2小时后静脉注射速尿50 mg/kg,对照组4只豚鼠。于药物注射后7天行听觉脑干诱发电位(ABR)仪检测试验组和对照组豚鼠耳蜗听功能,对阈值大于95 dB SPL豚鼠行耳蜗铺片免疫荧光染色和常规切片观察,并对耳蜗进行扫描电镜观察。
结果 实验组25只豚鼠中有13只豚鼠ABR测试阈值高于95 dB SPL,将这些致聋豚鼠作为观察对象,发现毛细胞和神经纤维明显受损,以耳蜗第一、二回损伤明显。结论 卡那霉素和速尿联合用药可导致豚鼠毛细胞和神经纤维严重受损,是建立耳聋模型的一种快速而有效的方法。
【关键词】 卡那霉素 速尿 听觉脑干诱发电位 耳蜗 组织病理学 免疫荧光 【Abstract】 Objective To investigate the ototoxicity of co-administration of kanamycin(KM) with the loop diuretic furosemide to guinea pigs. Methods Guinea pigs received an intramuscular injection of KM(500 mg/kg) followed 2h later by an intravenous infusion of furosemide(50 mg/kg). Auditory brainstem responses(ABRs) were recorded to monitor the animals' hearing at the 7th day after the drug administration. Immunohistochemical and histopathological changes were observed by using light microscopy and scanning electron microscopy. Results Subsequent ABR monitoring showed that profound hearing loss was both bilateral and permanent. Histopathological examination showed an absence of all inner and outer hair cells in the basal cochlea. The extent of neurofiber lesion was also eveident at the basal cochlea and dependent on the period of survival following the deafening procedure. Conclusion The co-administration of KA and furosemide effectively produces a profound hearing loss in guinea pigs and it is an effective deafening method for acute animal experiments. 【Key words】 kanamycin(KM); Furosemide; Auditory brainstem responses(ABRs);; Cochlear histopathology 联合应用肌肉注射卡那霉素(kanamycin,KM)和利尿酸(ethacrynic acid,EA)进行动物耳聋造模具有单次给药诱导耳聋而不必刺激耳蜗或者圆窗的优点〔1〕。卡那霉素是氨基糖甙类抗生素,其内耳毒性临床和试验研究已有不少报道;速尿是袢利尿剂,速尿耳毒性的试验研究表明〔2〕其能使血管纹边缘细胞产生病变,我们的前期实验采用听性脑干反应(ABR)等项检测证明,在KM和EA联合用药后三天,豚鼠听功能即严重受损〔3〕。
本研究利用冰冻切片、耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶(SDH)染色法、免疫荧光染色和扫描电镜观察技术,从内耳病理形态学方面评价卡那霉素和速尿联合应用对豚鼠耳蜗的毒性作用。 1 材料和方法 1.1 动物分组 选用耳廓反应灵敏的健康成年白色红目豚鼠29只,雌雄不限,体重250 ~ 300 g(由解放军总医院实验动物中心提供),随机分成两组,实验组25只,空白对照组4只。
1.2 动物用药 实验组豚鼠先给予硫酸卡那霉素 500 mg/kg大腿内侧肌肉注射一次,2小时后给予速尿静脉注 射:先用速眠新0.01 ml /kg大腿内侧肌肉注射麻醉动物,手术暴露一侧颈静脉,按50 mg/kg于30秒钟内将速尿注入〔3〕。 硫酸卡那霉素:25万单位/ ml,天津药业焦作有限公司生产, 批号: 06051531; 速尿:10 mg/ml,天津金耀氨基酸有限公司生产,批号:0606191。
速眠新:1.5 ml,解放军军需大学畜牧研究所提供,主要成分为氟哌啶醇、新眠灵、氯胺酮。 1.3 听性脑干反应(ABR)阈值测试 两组豚鼠均于用药后7天应用美国智听公司Intelligent Hearing System Smart EP2.22 系统, 在隔声屏蔽室内行双侧ABR阈值测试。
刺激声用短纯音(tone burst),带通滤波宽度为300 ~ 3 000 Hz,叠加次数1 024次,扫描时间10 ms。电极设置为:颅顶为记录电极,耳为参考电极,地极置入鼻尖。
短纯音2 kHz, 4 kHz, 8 kHz,16 kHz作为刺激音。 1.4 标本制备 断头取出颞骨,打开听泡,在耳蜗顶部钻一小孔,同时打开椭圆窗和圆窗;再用吸管从蜗尖小孔向耳蜗内灌入4% 多聚甲醛固定液,至液体从两窗流出,然后将颞骨浸入固定液浸泡固定。
取实验组ABR阈值大于95 dB SPL的8只豚鼠耳蜗和对照组3只耳蜗做常规冰冻切片,实验组ABR阈值大于95 dB SPL的14只豚鼠耳蜗和对照组3只耳蜗进行全耳蜗基底膜铺片免疫荧光染色,取试验组ABR阈值大于95 dB SPL的4只豚鼠耳蜗和对照组2只豚鼠耳蜗制备扫描电镜样品。 1.5 免疫荧光组织化学染色 耳蜗铺片标本用0.01 mol/L磷酸缓冲液(PBS)洗三遍。
0.1% Triton-PBS浸泡三分钟。10% 羊血清(稀释于0.01% Triton-PBS)室温封闭30分钟,倾去羊血清封闭液勿洗。
加入一抗兔来源MyosinVI抗体和鼠来源Neurofilament抗体(SIGMA生物技术公司), 用3% 羊血清Triton-PBS稀释, 4℃ 冰箱过夜。 0.1% Triton-PBS洗10分钟各三次。
加入二抗(荧光染料Alexa Flour 488标记的羊抗兔和羊抗鼠IgG抗体), 室温下。
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