众文网1.我想写一篇关于大肠杆菌的论文,字数1500左右,应该从那些方面入手
0引言 脆性X综合征（fragile X syndrome, FXS）是一种最常见的遗传性智力发育不全综合征，有超过99%的FXS是由脆性X智障基因1(fragile X mental retardation, FMR1)中5′端非编码区CGG三核苷酸重复序列不稳定扩增及其CpG岛异常甲基化导致. FMR1基因的表达产物FMRP的缺乏导致FXS的发生[1-2]. 本实验对编码基因存在于3号染色体[3]，能与FMR1 基因5′ز d (CGG)nز3′重复序列特异性结合的蛋白CGGBP1进行原核表达，并对其DNA结合活性进行研究. 1材料和方法 1.1材料 大肠杆菌DH5α， BL21( DE3)和表达载体pRSET A均为本实验室保存. 质粒提取试剂盒购自Sigma公司； 限制性内切酶BamH I和KpnI购自宝生物工程公司；T4 DNA连接酶购自Promega公司； Ni2+زNTA金属螯合蛋白质纯化系统购自Qiagen公司；链酶亲和素磁珠购自Dynal公司；低分子质量蛋白标准购自上海西巴斯生物技术有限公司. 1.2方法 1.2.1表达载体的构建 根据CGGBP1基因起始密码子和终止子邻近序列设计PCR引物：CGGBP1F CGC GGA TCC GAG CGA TTG TAG TAA CAG CA,CGGBP1R GGG GTA CCT CAA CAA TCT TGT GAG TTG AG. 其上游及下游引物分别加入BamHI和KpnI酶切识别位点序列（引物序列下划线部分）. PCR反应以人淋巴细胞cDNA文库为模板，扩增编码CGGBP1的基因序列. 设计PCR扩增体系25 μL，灭菌去离子水10 μL,10*反应缓冲液2.5 μL,25 mmol/L MgCl2 2.0 μL,DMSO 2.5 μL,4* dNTP混合物（每种2.5 mmol/L）2 μL,CGGBP1F和CGGBP1R各10 pmol，模板3.5 μL(50 ng/μL), Taq DNA(5 μ/μL)聚合酶0.5 μL. 扩增条件：95℃预变性5 min，再94℃ 30 s, 53℃ 1 min,72℃ 1 min循环40次，最后72℃终末延伸产物10 min. PCR产物经琼脂糖电泳分离，用胶回试剂盒回收目的基因. 用BamHI和KpnI酶切PCR产物和pRSET A，酶切产物电泳后回收，在T4连接酶作用下，目的片段定向克隆至pRSET A的BamHI和KpnI克隆位点. 将重组质粒转入大肠杆菌DH5α，接种到含氨苄青霉素的LB培养基平板并挑取单菌落. 1.2.2融合蛋白的诱导表达 将测序正确的重组质粒转入BL21( DE3). 挑取携带目标质粒的单菌落接种于含100 mg/L氨苄青霉素的LB培养基中， 37℃振荡培养12 h， 按10 mL/L比例转接于新鲜培养基，37℃振荡培养至对数生长期时，加入IPTG至终浓度1 mmol/L,32℃诱导振荡培养4 h，离心收集菌体，SDSزPAGE分析重组蛋白的表达. 1.2.3蛋白表达形式的分析 取5 mL菌液离心，用500 μL的裂解液（10 mmol/L 咪唑，300 mmol/L NaCl及50 mmol/L磷酸二氢钠 pH 8.0）重悬，加溶菌酶至终浓度为1 mg/mL，冰浴30 min，超声波裂菌，离心后分别将上清和沉淀进行SDSزPAGE分析. 1.2.4融合蛋白的纯化 将1 mL 500 mL/L Ni2+زNTA悬液和4 mL细菌裂解上清液轻轻混匀4℃放置60 min，直接过柱. 过柱结束后，用4 mL漂洗液（20 mmol/L 咪唑，300 mmol/L NaCl及50 mmol/L 磷酸二氢钠 pH 8.0），洗脱未和Ni珠结合的杂蛋白. 经过2次漂洗后再用0.5 mL洗脱液（250 mmol/L 咪唑，300 mmol/L NaCl及50 mmol/L 磷酸二氢钠 pH 8.0） 3次洗脱特异结合的目的蛋白，分步收集. 取收集液，进行SDSزPAGE分析. 1.2.5CGGBP1与（CGG）29重复序列双链DNA结合 实验取10 μL磁珠用1 mL的无RNA酶的三蒸水清洗磁珠2次，除去防腐剂. 1*生物素亲和素结合缓冲液（10 mmol/L TrisزHCl,2 mol/L NaCl,1 mmol/L EDTA,1 g/L Tween 20）15 μL重悬磁珠，各5 μL分3组实验. 其中一组加入25 μL(100 ng/μL)生物素化的（CGG）29重复序列双链DNA，另外两组分别加入25 μL(100 ng/μL)非生物素化的（CGG）29重复序列双链DNA和25 μL三蒸水做对照；三组分别再加入2*生物素亲和素结合缓冲液30 μL,25℃轻摇1 h. 经磁力吸附后，弃上清. 重复上述步骤3次；加入纯化后CGGBP1(500 μg/mL)15 μL 和2*核酸蛋白结合缓冲液（20 mmol/L HEPES,100 mmol/L NaCl,0.5 mmol/L DTT,100 g/L甘油）20 μL，室温下静置30 min；经磁力吸附后，弃上清；用1*核酸蛋白结合缓冲液清洗磁珠2次；加三蒸水10 μL，沸水煮10 min，进行SDSزPAGE分析. 2结果 2.1原核表达载体的构建及鉴定 扩增产物在15 g/L的琼脂糖凝胶电泳，可观察到一条约504 bp的条带（图1）； 重组质粒pRSET A/CGGBP1及质粒pRSET A分别用BamHI和KpnI酶切，pRSET A/CGGBP1分为两个片段，分别为2.9 ku和504 bp（图2），均与预计结果相同. 2.2CGGBP1的表达 用BamHI和KpnI双酶切pRSET A/CGGBP1表达质粒，筛选阳性重组质粒. 携带有pRSET A/CGGBP1质粒的E.coli BL21(DE3)菌株，经IPTG诱导后，在Mr 约25 000处出现1条表达条带；而未经IPTG诱导的菌体则无此条带. 诱导后的菌体经溶菌酶及超声波裂解，离心后分为上清和沉淀两部分. 经SDSزPAGE分析表明，CGGBP1部分存在于细菌裂解液的上清中，为可溶性蛋白，上清液中的目标蛋白相对较少（图3）. 2.3CGGBP1蛋白纯化 在表达质粒pRSET A多克隆酶切位点的上游， 插入有连续6个组氨酸的序列 —（His ）6 tag. 重组质粒经诱导表达后，（His ）6 tag可以和外源插入片段共同表达. 利用（His ）6 。
2.鸡大肠杆菌病的治疗与预防
希望能帮助你，朋友，能心里真心谢个就好 我就心满意足了 其他不用的
防制方法鉴于该病的发生与外界各种应激因素有关，预防本病首先是在平时加强对鸡群的饲养管理，逐步改善鸡舍的通风条件，认真落实鸡场兽医卫生防疫措施。种鸡场应加强种蛋收集、存放和整个孵化过程的卫生消毒管理。另外应搞好常见多发疾病的预防工作。所有这些对预防本病发生均有重要意义。
鸡群发病后可用药物进行防治。近年来在防治本病过程中发现，大肠杆菌对药物极易产生抗药性，如青霉素、链霉素、土霉素、四环素等抗生素几乎没有治疗作用。氯霉素、庆大霉素、氟哌酸、新霉素有较好的治疗效果。但对这些药物产生抗药性的菌株已经出现且有增多趋势。因此防治本病时，有条件的地方应进行药敏试验选择敏感药物，或选用本场过去少用的药物进行全群给药，可收到满意效果。早期投药可控制早期感染的病鸡，促使痊愈。同时可防止新发病例的出现。鸡已患病，体内已造成上述多种病理变化的病鸡治疗效果极差。
本病发生普遍，各种年龄的鸡均可发病，药物治疗效果逐渐降低而且又增加了养鸡的成本。近年来国内已试制了大肠杆菌死疫苗，有鸡大肠杆菌多价氢氧化铝苗和多价油佐剂苗，经现场应用取得了较好的防治效果。由于大肠杆菌血清型较多，制苗菌株应该采自本地区发病鸡群的多个毒株，或本场分离菌株制成自家苗使用效果较好。种鸡在开产前接种疫苗后，在整个产蛋周期内大肠杆菌病明显减少，种蛋受精率、孵化率，健雏率有所提高，减少了雏鸡阶段本病的发生。
在给成年鸡注射大肠杆菌油佐剂苗时，注苗后鸡群有程度不同的注苗反应，主要表现精神不好，喜卧，吃食减少等。一般1-2天后逐渐消失，无须进行任何处理。因此应在开产前注苗较为合适。开产后注苗往往会影响产蛋。
3.跪求关于大肠杆菌的开题报告及论文
怎么写开题报告呢？ 首先要把在准备工作当中搜集的资料整理出来，包括课题名称、课题内容、课题的理论依据、参加人员、组织安排和分工、大概需要的时间、经费的估算等等。
第一是标题的拟定。课题在准备工作中已经确立了，所以开题报告的标题是不成问题的，把你研究的课题直接写上就行了。
比如我曾指导过一组同学对伦教的文化诸如“伦教糕”、伦教木工机械、伦教文物等进行研究，拟定的标题就是“伦教文化研究”。 第二就是内容的撰写。
开题报告的主要内容包括以下几个部分： 一、课题研究的背景。 所谓课题背景，主要指的是为什么要对这个课题进行研究，所以有的课题干脆把这一部分称为“问题的提出”，意思就是说为什么要提出这个问题，或者说提出这个课题。
比如我曾指导的一个课题“伦教文化研究”，背景说明部分里就是说在改革开放的浪潮中，伦教作为珠江三角洲一角，在经济迅速发展的同时，她的文化发展怎么样，有哪些成就，对居民有什么影响，有哪些还要改进的。 当然背景所叙述的内容还有很多，既可以是社会背景，也可以是自然背景。
关键在于我们所确定的课题是什么。 二、课题研究的内容。
课题研究的内容，顾名思义，就是我们的课题要研究的是什么。比如我校黄姝老师的指导的课题“佛山新八景”，课题研究的内容就是：“以佛山新八景为重点，考察佛山历史文化沉淀的昨天、今天、明天，结合佛山经济发展的趋势，拟定开发具有新佛山、新八景、新气象的文化旅游的可行性报告及开发方案。
” 三、课题研究的目的和意义。 课题研究的目的，应该叙述自己在这次研究中想要达到的境地或想要得到的结果。
比如我校叶少珍老师指导的“重走长征路”研究课题，在其研究目标一栏中就是这样叙述的： 1、通过再现长征历程，追忆红军战士的丰功伟绩，对长征概况、长征途中遇到了哪些艰难险阻、什么是长征精神，有更深刻的了解和感悟。 2、通过小组同学间的分工合作、交流、展示、解说，培养合作参与精神和自我展示能力。
3、通过本次活动，使同学的信息技术得到提高，进一步提高信息素养。 四、课题研究的方法。
在“课题研究的方法”这一部分，应该提出本课题组关于解决本课题问题的门路或者说程序等。一般来说，研究性学习的课题研究方法有：实地调查考察法（通过组织学生到所研究的处所实地调查，从而得出结论的方法）、问卷调查法（根据本课题的情况和自己要了解的内容设置一些问题，以问卷的形式向相关人员调查的方法）、人物采访法（直接向有关人员采访，以掌握第一手材料的方法）、文献法（通过查阅各类资料、图表等，分析、比较得出结论）等等。
在课题研究中，应该根据自己课题的实际情况提出相关的课题研究方法，不一定面面俱到，只要实用就行。 五、课题研究的步骤。
课题研究的步骤，当然就是说本课题准备通过哪几步程序来达到研究的目的。所以在这一部分里应该着重思考的问题就是自己的课题大概准备分几步来完成。
一般来说课题研究的基本步骤不外乎是以下几个方面：准备阶段、查阅资料阶段、实地考察阶段、问卷调查阶段、采访阶段、资料的分析整理阶段、对本课题的总结与反思阶段等。 六、课题参与人员及组织分工。
这属于对本课题研究的管理范畴，但也不可忽视。 因为管理不到位，学生不能明确自己的职责，有时就会偷懒或者互相推诿，有时就会做重复劳动。
因此课题参与人员的组织分工是不可少的。最好是把所有的参与研究的学生分成几个小组，每个小组通过民主选举的方式推选出小组长，由小组长负责本小组的任务分派和落实。
然后根据本课题的情况，把相关的研究任务分割成几大部分，一个小组负责一个部分。最后由小组长组织人员汇总和整理。
七、课题的经费估算。 一个课题要开展，必然需要一些经费来启动，所以最后还应该大概地估算一下本课题所需要 的资金是多少，比如搜集资料需要多少钱，实地调查的外出经费，问卷调查的印刷和分发的费用，课题组所要占用的场地费，有些课题还需要购买一些相关的材料，结题报告等资料的印刷费等等。
所谓“大军未动，粮草先行”，没有足够的资金作后盾，课题研究势必举步维艰，捉襟见肘，甚至于半途而废。因此，课题的经费也必须在开题之初就估算好，未雨绸缪，才能真正把本课题的研究做到最好。
4.鸡大肠杆菌病治疗药物?用什么药,用药方法以及用量
鸡大肠杆菌病治疗药物有维克赞（Suramox50%OSP）阿莫西林可溶性粉，主要成分阿莫西林三水合物；主要用于治疗鸡对阿莫西林敏感的革兰氏阳性菌和阴性菌的感染。
用法与用量：以本品计。混饮，每1kg体重，鸡30~40mg，一日1 次，连用5~7日。
或每1L水，鸡0.15~0.20g，一日1次，连用5~7日。用这种药的好处是副作用少，停药后12小时后无药残，现在很多抗生素都有药残；详细的可做实验。
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5.如何防治
大肠杆菌是一种条件性致病菌，感染鸡后，可引起心包炎、气囊炎、败血症、脐炎、眼炎、卵黄性腹膜炎或慢性肿瘤样肉芽肿等多种疾病，统称鸡大肠杆菌病，是造成养鸡业重大经济损失的疾病之一。
本病可通过消化道、呼吸道感染。当各种应激因素造成机体免疫功能下降时，就会发生感染，因此，本病常成为某些传染病的并发或继发性疾病。
（1） 临床表现：鸡大肠杆菌病没有特征的临床表现，但与鸡只发病日龄、病程长短、受侵害的组织器官及部位、有无继发或混合感染有很大关系。① 初生雏鸡脐炎，俗称“大肚脐”。
其中多数与大肠杆菌有关。病雏精神沉郁，少食或不食，腹部大，脐孔及其周围皮肤发红，水肿。
此种病雏多在1周内死亡或淘汰。另一种表现为下痢，除精神、食欲差，可见排出泥土样粪便，病雏1~2天内死亡。
死亡不见明显高峰。② 在育雏期间其中包括肉用仔鸡的大肠杆菌病，原发感染比较少见，多是由于继发感染和混合感染所致。
尤其是当雏鸡阶段发生鸡传染性法氏囊病的过程中，或因饲养管理不当引起鸡慢性呼吸道疾病时常有本病发生。 病鸡食欲下降、精神沉郁、羽毛松乱、拉稀。
同时兼有其他疾病的症状。育成鸡发病情况大致相似。
③ 产蛋阶段鸡群发病，多由饲养管理粗放，环境污染严重，或正值潮湿多雨闷热季节发生。这种情况一般以原发感染为主。
另外，可继发于其他疾病如鸡白痢、新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎和慢性呼吸道疾病发生的过程中。 主要表现为产蛋量不高，产蛋高峰上不去，产蛋高峰维持时间短，鸡群死淘率增加。
病鸡临床表现有如鸡冠萎缩、下痢、食欲下降等表现。（2） 剖检病变：典型病变有急性败血症、气囊炎、心包炎、肝周炎、全眼球炎、输卵管炎、腹膜炎、大肠杆菌肉芽肿等。
① 急性败血症。 由大肠埃希菌引起的急性败血症主要发生于雏鸡。
在成年鸡和育成鸡中常与鸡伤寒和鸡霍乱相类似。病鸡肌肉丰满，嗉囊内充满食物，剖检发现肝脏呈绿色，胸肌充血，有时肝脏内有小的白色病灶。
② 气囊炎。主要发生于3~12周龄的鸡，6~9周龄的鸡发病率最高。
气囊炎常常继发或并发于传染性支气管炎、新城疫、支原体病等，因为这些病的病原增强了呼吸道对大肠埃希菌的易感性。 吸入附有该菌的粉尘是最主要的途径之一。
鸡舍的灰尘和氨气导致鸡的上呼吸道纤毛失去运动性，从而使吸人有大肠埃希菌的灰尘感染气囊。受感染的气囊增厚，胸气囊与肺之间、腹气囊与腹壁之间有灰色或白色干酪样凝块。
轻微的气囊上有泡沫。严重者可见呼吸困难，有啰音，咳嗽，食欲消失，病鸡消瘦，最后死亡。
③ 心包炎。经常伴发心肌炎，心包囊呈云雾状，心外膜水肿，并覆有淡色渗出物，心包囊内充满淡黄色纤维蛋白性渗出物。
④ 眼炎。是大肠埃希菌败血症一种常见的表现形式，经常是一侧眼睛和眼前房积脓、流泪、有泡沫、失明、脉络膜充血，视网膜完全被破坏。
有个别病鸡能康复，但大多数在鸡发病后很快死亡。 ⑤ 输卵管炎。
当左侧腹气囊感染大肠埃希菌后，许多母鸡发生慢性输卵管炎，输卵管扩张、壁变薄，内有大量干酪样团块，该团块随着时间的延长而增长，病鸡常在受到感染后的最初6个月死亡，发病后存活的鸡无产蛋能力，产蛋鸡也可能由于大肠杆菌侵入泄殖腔而患输卵管炎。 ⑥ 卵黄性腹膜炎。
产蛋母鸡可发生腹腔内大肠埃希菌感染。以急性死亡、纤维素性渗出物和游离的卵黄为特征。
⑦ 大肠杆菌肉芽肿。本病的特征是肝、盲肠、直肠、十二指肠和肠系膜发生火山口样肉芽肿，但脾脏没有病变。
（3） 防治大肠杆菌对许多种药物都敏感，如氨苄青霉素、金霉素、新霉素、庆大霉素、土霉素、壮观霉素、链霉素以及磺胺类药和新孢丁、桑普乐、立克杀等。 由于大肠杆菌不断产生耐药性，要作药物敏感性试验，以免用药无效。
加强通风，减小密度，及时转群，严格挑选种蛋和消毒种蛋是防止该病发生的有效方法。粪便污染种蛋是鸡群间致病性大肠杆菌相互传播的最重要途径，因此种蛋产出后要及时消毒人库，并淘汰破损和被粪便污染的种蛋。
被污染的饲料、饮水和老鼠的粪便中含有大量病原菌。鸡患支原体病、传染性支气管炎以及环境污染严重、通风不良等均可降低鸡群抵抗大肠杆菌感染的能力。
6.分析鸡大肠杆菌病的几种感染途径
一、鸡大肠杆菌病可通过呼吸道感染：由于禽类的特殊生理结构，鸡大肠杆菌病由肠道感染的较少，大部分情况下是由于呼吸道感染，在气囊内形成病变，不久侵害到各个脏器。
因此鸡大肠杆菌病与呼吸道病又称为“姊妹病”，主要有两种方式：1、呼吸道粘膜受损，清异能力下降。当鸡群发生呼吸道疾病，如支原体、新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、传染性鼻炎等疾病时；或舍内通风不良，氨气、硫化氢等有害气体蓄积；这些因素均会造成呼吸道粘膜受到损伤，粘膜表面的生理性排异物技能下降，助长大肠杆菌在气管、肺及气囊中定居繁殖。
2 、舍内通风不良，环境卫生差，经常不消毒，舍内有大量粉尘。大肠杆菌对干燥的抵抗力很强，附着在粪便、土壤、鸡舍内尘埃、孵化器绒毛上的病原可长期存活，鸡群通过呼吸吸入大量含有病原的尘埃，引发鸡大肠杆菌病。
二、鸡大肠杆菌病可经消化道感染：饮水、饲料被大肠杆菌污染，鸡群采食大量被大肠杆菌污染的饮水或饲料而感染鸡大肠杆菌病，尤以水源被污染引起发病最为常见。三、鸡大肠杆菌病继发性感染：当鸡群发生法氏囊、禽流感等疾病时，往往会引起鸡大肠杆菌病的发生，这是因为这些疾病的发生造成一定程度的免疫抑制，机体抵抗力下降造成鸡大肠杆菌病病发。
四、鸡大肠杆菌病的应激因素：当气候突变、转群、断喙、饲料突然改变等应激因素发生时，机体抵抗力下降，肠道内菌丛失去平衡，致病性大肠杆菌大量繁殖，造成鸡大肠杆菌病发生。五、鸡大肠杆菌病可经蛋传播：患有鸡大肠杆菌病性输卵管炎的母鸡，在蛋的形成过程中大肠杆菌进入蛋内；或种蛋产出后为粪便等赃物污染，蛋壳表面的大肠杆菌进入蛋内；这两种情况均造成经蛋垂直传播的鸡大肠杆菌病。
7.鸡大肠杆菌的基本简介
禽大肠杆菌病（avian colibacillosios）是由致病性大肠杆菌引起的。其主要的病型有胚胎和幼雏的死亡、败血症、气囊炎、心包炎、输卵管炎、肠炎、腹膜炎和大肠杆菌性肉芽肿等。由于常和霉形体病合并感染，又常继发于其他传染病（如新城疫、禽流感惑、传染性支气管炎、巴氏杆菌病等），使治疗十分困难。目前本病已成为危害养业的重要传染病，常造成巨大的经济损失。
8.白羽肉鸡大肠杆菌病的预防与治疗
肉鸡大肠杆菌病的发病特点 1.发病率高。
今年肉鸡大肠杆菌病的发生异常频繁，大大小小的养殖场几乎都暴发过。 2.死亡率高。
有的养殖场15日龄前大肠杆菌病的病死率就高达10-20%。 3.治疗难。
很多养殖户反映，各种各样的治疗大肠杆菌病的药物都用了，效果就是不理想。 4.复发率高。
在整个饲养周期中大肠杆菌病通常发生2-3次，有的养殖户仅对大肠杆菌病的防治用药就高达4次，养殖成本不断增加。 5.多与病毒病混合感染。
据我们临床调查，肉鸡大肠杆菌病很少是单一发生，多与鸡新城疫、肾传支、传染性法氏囊病等病毒病混合感染，给治疗带来了一定难度。 病理变化 肉鸡发生大肠杆菌病后病理变化多表现为：肝周炎、心包炎、气囊浑浊、有干酪样分泌物、卵黄收缩不良、卵黄性腹膜炎等变化；中大鸡发病有的还表现为腹水症。
预防措施 1.首先要选择质量好、健康的鸡苗，这是保证后期大肠杆菌病少发的一个基础。有的养殖户为了鸡苗价格的差异而选择便宜的，岂不知是丢了西瓜拣芝麻，少花了鸡苗钱却多用了药费。
2.大肠杆菌是条件性致病菌，所以良好的饲养管理是保证该病少发的关键。例如温度、湿度、通风换气、圈舍粪便处理等都与大肠杆菌病的发生息息相关。
3.适当的药物预防。适当的药物预防也是防止大肠杆菌病发生的一个不可缺少的措施。
药物的选择可根据鸡只的不同日龄多听从兽医专家的建议进行选择，切不可滥用。因为预防性用药和治疗性用药有所区别，尽可能的避免耐药性的发生。
治疗措施 1.首先要弄清该鸡群发生的大肠杆菌病是原发病还是继发病，是单一感染还是和其它疾病混合感染，这是成功治疗本病的关键。 2.通过细菌培养和药敏试验选择高敏的大肠杆菌防治药物作为首选药物。
3.增加维生素的添加剂量，提高机体抵抗力。 4.改善圈舍条件提高饲养管理水平。
总之，肉鸡大肠杆菌病的预防和治疗需要综合进行，养殖户不能只靠用药对其防治。