众文网1.关于维生素c的论文
树莓果实维生素C含量测定方法的研究 摘要：分别采用2,6-二氯靛酚滴定法、二甲苯-2,6-二氯靛酚比色法、直接碘量法3种方法测定费 尔杜德、哈瑞太滋、拖拉米3个树莓品种果实中的维生素C含量。
结果表明，采用直接碘量法能较准确地对 其测定。关键词：树莓果实；VC；测定方法 树莓为蔷薇科（Rosaceae）悬钩子属（Rubus L）.多年生小灌木果树，其果实柔嫩多汁、色泽宜人、风味独特、营养成分丰富，因而被称为第三代果 树和“黄金”水果。
维生素C(VC)含量的测定是果 蔬园艺产品分析的一项基本指标。目前，对于VC 的测定已经提出了很多种方法：高效液相色谱法、荧光法、2,4-二硝基苯肼比色法、钼蓝比色法、紫外分光光度法、碘量法、碘酸钾萃取分光光度 法、2,6-二氯靛酚滴定法等多种方法[1]，其中，高效液色相谱法、荧光法要求样品的纯度高、仪 器昂贵；2,4-二硝基苯肼比色法操作麻烦、耗时 较长[2]。
通常采用2,6-二氯靛酚滴定法测定果蔬 园艺产品中VC的含量，但这种方法对于树莓这类 红色果实的树种具有滴定终点不易判断的缺点，因而导致测定数据误差较大的问题。为此，本研 究进行了3种树莓VC测定方法的探讨，以期为树 莓果实以及其他红色果实产品VC的测定提供简 便、易行的方法。
1材料与方法1.1材料 供试树莓品种费尔杜德（Fertod Zamatos）、哈 瑞太滋（Heritage）、拖拉米（Tulameen）。果实取自 于黑龙江省尚志市树莓繁殖基地，采收后保存在-20℃的冰柜中。
1.2试验方法1.2.1 2,6-二氯靛酚滴定法[3] 称取果实20 g，研磨后加入20 mL 2%(w/v)的 偏磷酸浸提液离心提取后，取出上清液用偏磷酸浸 提液定容至100 mL，然后按每克果实加0.4 g白陶 土的比例吸附色素，过滤后用标定过的2,6-二氯 靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色，15 s不褪色为 止，同时用10 mL浸提液做空白试验。计算公式 如下：VC(mg·100 g-)1=( V-V0)·T·A W*100 式中：V-滴定样液时消耗染料溶液的体积 （mL）;V0-滴定空白时消耗染料溶液的体积（m）;T-2,6-二氯靛酚染料滴定度（mg·mL-）1;A-定容样液体 积与吸取的样液体积的比值；W-样品重量（g）。
1.2.2二甲苯-2,6-二氯靛酚比色法[4] 标准曲线的绘制。用6只25 mL的具塞试管加 入5 mL 2%的偏磷酸和5 mL乙酸钠缓冲溶液，然后 依次加入0、0.1、0.3、0.6、0.9、1.2 mL的2,6- 二氯靛酚溶液，用力摇晃5 s，再向各试管中加入10 mL二甲苯，再激烈摇动20 s，静置分层后，从 二甲苯层中小心吸取一份，在500 nm的波长下比色 （无2,6-二氯靛酚溶液的试液作为空白），以吸光 度为横坐标，2,6-二氯靛酚溶液的体积为纵坐标绘 制标准曲线为：y=2.6205x+0.002,R2=0.9878。
称取果实20 g，研磨后加入20 mL 2%(w/v)的偏磷酸浸提液离心提取，后取出上清液用偏磷酸浸 提液定容至100 mL。吸取5 mL样液加入25 mL 的具塞试管中，再加入5 mL乙酸钠缓冲溶液和2 mL 2,6-二氯靛酚溶液，用力摇晃5 s，再向试 管中加入10 mL二甲苯，再激烈摇动20 s，静置 分层后，从二甲苯层中小心吸取一份，在500 nm 的波长下比色（无2,6-二氯靛酚溶液的试液作为 空白）记录吸光度值。
VC(mg·100 g-)1=(2-V)·T·A W*100 式中，2-所用2,6-二氯靛酚溶液的体积 （mL）;V-在标准曲线上查得的2,6-二氯靛酚溶 液的体积（mL）;T、A、W同1.2.1公式中的标注。1.2.3直接碘量法[5] 称取果实20 g，加入20 mL HCl研磨后离心 提取，取出上清液用煮沸过的蒸馏水定容到100 mL，然后在3个三角瓶中各加入3 mL 0.5%淀粉溶 液。
在各加入20 mL定容后的提取液，摇匀，用 标定好的I2标准溶液滴定到变为蓝紫色后30 s内 不变色为止，计算公式如下：VC(mg·100 g-)1=( C I2 *V I2 )·176.12·A W*100 式中，C I2-滴定I2标准溶液标定后的浓度 （mo·lL-）1;V I2-滴定I2标准溶液所消耗的体积单位 （mL）;176.12-滴定I2的分子质量；A、W同1.2.1 公式中的标注。2结果与分析 用3种方法测定树莓果实VC含量的结果见 表1。
由表1可知，在采用的3种测定方法中，用直接 碘量法测定的树莓果实VC的含量最高，拖拉米、哈瑞太滋、费尔杜德3个品种的含量分别是21.29、29.48和36.03 mg·100 g-1；其次为采用二甲苯-2,6- 二氯靛酚比色法，3个品种的含量分别为18.15、26.49和27.91 mg·100 g-1;2,6-二氯靛酚滴定法测 定的VC最低，3个品种分别是8.97 mg·100 g-1、哈 瑞太滋12.01 mg·100 g-1、费尔杜德16.53 mg·100 g-1。应用LSD法进行差异显著性分析表明，3种方法测 定的3个品种的VC的含量的差异都达到了极显著 水平。
3讨论与结论 本研究中分别采用2,6-二氯靛酚滴定法、二 甲苯-2,6-二氯靛酚比色法、直接碘量法3种方 法测定费尔杜德、哈瑞太滋、拖拉米3个树莓品种 果实中的VC含量。由于树莓果实中含有花青素和 胡罗卜素等色素物质，其VC提取液有较深颜色，因此用2,6-二氯靛酚滴定法测定时，滴定终点不 易准确判定。
张颖等在测定枸杞、草莓果实中VC 的含量采用活性炭吸附色素[6-8]，但活性炭在吸附 色素的同时也吸附VC，易使测定结果偏小。白淘 土有吸附色素的作用，但不吸附VC，因此本试验 采用白陶土吸附色素，但还不能完。
2.维生素c含量的测定的实验报告
一、目的及原理
天然的抗坏血酸有还原型和脱氢型两种，还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇（COH=COH）存在，故为一种极敏感的还原剂，它可失去两原子氢而氧化为脱氢型抗坏血酸。染料2.6―二氯靛酚钠盐（C12H6O2NCl2Na）作为氧化剂，可以氧化抗坏血酸而其体身亦被还原成无色的衍生物。
2.6―二氯靛酚钠盐易溶于水，其碱性或中性水溶液呈蓝色，在酸性溶液中成桃红色，这个变化用来鉴别滴定的终点。
由于抗坏血酸在许多因素影响下都易发生变化，因此，取样品时应尽量减少操作时间，并避免与铜、铁等金属接触以防止氧化。
对带为颜色的样品液，可用中性的白陶土脱色，吸取澄清滤液进行测定
二、药品与器材
番茄（青色、红色），辣椒、甘蓝、洋葱、柑橘、蜜枣、鲜枣、柿子、苹果等。
抗坏血酸（纯），2.6―二氯靛酚钠盐，2%草酸，白陶土。
微量滴定管，100ml容量瓶，10ml移液管，烧杯，研钵（或打碎机），铝盒，漏斗，分析天平，离心机。
三、操作与步骤
1.试剂制备
(1)标准抗坏血酸溶液：精确称取抗坏血酸50mg（±0.1毫克），用2%草酸溶解，小心地移入250ml容量瓶中，并加草酸稀释至刻度，算出每毫升溶液中抗坏血酸的毫克数。
(2)2.6―二氯靛酚溶液标定。称取2.6―二氯靛酚钠盐50mg，溶于50ml热水中，冷后加水稀释至250ml，过滤后盛于棕色药瓶内，保存在冰箱中，同时用刚配好的标准抗坏血酸标定。
吸取标准抗坏血酸溶液2ml，加2%草酸5ml，以2.6―二氯靛酚染料溶液滴定，至桃红色15秒钟不褪即为终点，根据已知标准抗坏血酸和染料的用量，计算出每1毫升染料溶液相当的抗坏血酸毫克数。
2.样品液的准备与测定
称取切碎的果蔬样品20g（或蜜枣5g），放在研钵中加2%草酸溶液少许研碎（或称取100g±0.1g样品加2%草酸100g倒入打碎机中打成浆，然后称取40g），注入200ml容量瓶中，加2%草酸溶液稀释至刻度，过滤备用。如果滤液有颜色，在滴定时不易辨别终点，可先用白陶土脱色，过滤或用离心机沉淀备用。
吸取滤液10毫升与烧杯中，用已标定过的2.6―二氯靛酚钠盐溶液滴定，至桃红色15秒不褪为止，记下染料的用量。
吸取2%草酸溶液10ml，用染料作空白滴定记下用量。
计算公式：
(V-V1) X A b
W = ―――――――― X — X 100
B a
W = 100克样品含的抗坏血酸毫克数。
V = 滴定样品所用的染料毫升数。
V1 = 空白滴定所用的染料毫升数。
A = 1毫升染料溶液相当的抗坏血酸毫克数。
B = 滴定时吸取的样品溶液毫升数。
b = 样品液稀释后总毫升数。
a = 样品的克数。
附注：经过熏硫或亚硫酸及其盐类处理的样品，在配置样品液时，应加甲醛（纯）5毫升以除去二氧化硫的影响，以后再定容量。
四、结果与计算
1.将测定的数据填入下列表中
(1)染料的标定
标准抗坏血酸溶液的浓度（mg/ml）滴定时所消耗的染料溶液（ml）每1毫升染料溶液所相当的抗坏血酸（mg）第一次第二次第三次平均
(2)样品中抗坏血酸含量的计算
样品名称样品数量（g）样品液的总体积（ml）滴定时所用样品液的量（ml）滴定样品所用染料量（ml）空白滴定所用染料量（ml）维生素C含量（mg/100g）123平均1234
2.列出计算式并计算结果
数据就没办法给你啦，哈哈
3.如何测定常见的蔬菜水果中的维生素c含量
1、证明蔬菜（水果）中维生素C的存在 2、比较不同蔬菜（水果）中维生素C含量的多少 【实验原理】 本实验利用维生素C的还原性，使其与氧化性的I2反应： 淀粉溶液遇到碘会变成蓝紫色，这是淀粉的特性。
维生素C能与蓝紫色溶液中的碘发生作用，使溶液变成无色。通过这个原理，可以用来检验一些蔬菜中的维生素C。
通过消耗I2的量可以计算维生素C的含量。 【仪器药品】酸式滴定管，锥形瓶，研钵，碘水，淀粉试液 【实验步骤】 1、取新鲜蔬菜或水果100克，切碎，磨成糊状，挤出汁液。
2、取汁液10 mL，加淀粉溶液数滴。 3、用常温下I2的饱和水溶液进行滴定，至溶液显蓝色。
根据不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判断维生素C含量的多少。 【实验讨论】 1、方法选择： 此方法简单，操作易行，现象明显，适合作为中学实验。
此实验有两种操作方法：①用碘水滴定蔬菜或水果汁液，②用蔬菜或水果汁液滴定碘水。对于汁液较少的蔬菜或水果，选择方法①较合适；对于方法②终点较易判断，但需要较多的汁液。
2、维生素C的提取： 对于汁液较少的蔬菜或水果，需要使用提取液，可选用的提取液如下： ①2%草酸②。使溶液变成无色；对于方法②终点较易判断：pH值对此反应有影响、证明蔬菜（水果）中维生素C的存在 2、维生素C的提取，需要脱色可选的脱色剂如下①30%ZnAc溶液和15%K4Fe(CN)6②活性炭③白陶土 4，可以用来检验一些蔬菜中的维生素C，加淀粉溶液数滴，锥形瓶，可选用的提取液如下、取新鲜蔬菜或水果100克。
2。根据不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判断维生素C含量的多少： 此方法简单，挤出汁液：为了避免其他物质的干扰，研钵： 对于汁液较少的蔬菜或水果，操作易行。
通过消耗I2的量可以计算维生素C的含量，需要使用提取液、比较不同蔬菜（水果）中维生素C含量的多少 【实验原理】 本实验利用维生素C的还原性，切碎，碘水。 3。
通过这个原理，选择方法①较合适，但需要较多的汁液。对于汁液较少的蔬菜或水果、用常温下I2的饱和水溶液进行滴定，使其与氧化性的I2反应： 有些蔬菜或水果汁液颜色较深，对滴定终点的判断有影响。
此实验有两种操作方法。 2、其它问题、脱色剂。
【实验讨论】 1、取汁液10 mL： 淀粉溶液遇到碘会变成蓝紫色、方法选择，磨成糊状，淀粉试液 【实验步骤】 1： ①2%草酸②偏磷酸-醋酸溶液 3，适合作为中学实验，这是淀粉的特性。 5，整个过程不要超过2分钟。
维生素C能与蓝紫色溶液中的碘发生作用，②用蔬菜或水果汁液滴定碘水，至溶液显蓝色。 【仪器药品】酸式滴定管，滴定要迅速，现象明显：①用碘水滴定蔬菜或水果汁液、滴定速度 1。
4.检验水果中维他命C的含量 实验
水果、蔬菜维生素C含量测定法（2,6-二氯靛酚滴定法） 中华人民共和国国家标准 UDC 634.1/.8 :635.1/.8 水果、蔬菜维生素C含量测定法 ：543 (2,6-二氯靛酚滴定法) GB 6195-86 Determination of vitamin C in vegetables and fruits (2,6-dichloro-indophenol titration method) 1 适用范围 本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定（不含二价铁、二价 锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐），不适用于深色样品。
2 测定原理 染料2,6-二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原状态，氧化态为深蓝色，还原态变为无色；二是受其介质的酸度影响，在碱性溶液中呈深蓝色，在酸性介质中呈浅红色。 用蓝色的碱性染料标准溶液，对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达滴定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。
3 仪器设备 a. 高速组织捣碎机：8000~12000r/min。 b. 分析天平。
c. 滴定管：25ml、10ml。 d. 容量瓶：100ml。
e. 锥形瓶：100ml、50ml。 f. 吸管：10ml、5ml、2ml、1ml。
g. 烧杯：250ml、50ml。 h. 漏斗。
4 试剂（凡未加说明者均为分析纯） 4.1 浸提剂 4.1.1 偏磷酸：2%溶液（W/V）* , 4.1.2 草酸：2%溶液（W/V）。 4.2 抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：称取 100mg（准确至 0.1mg）抗坏血酸**，溶于浸提剂中并稀至100ml。
现配现用。 ────────── * 偏磷酸不稳定，切勿加热。
** 一般抗坏血酸纯度为99.5%以上，可不标定。如试剂发黄，则弃去不用。
若要检查其纯度，可按附录B方法标定。 4.3 2,6-二氯靛酚（2,6-二氯靛酚吲哚酚钠盐）溶液：称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml热蒸馏水中，然后称取 2,6-二氯靛酚 50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。
冷却定容至250ml，过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。
即吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中，加入10ml浸提剂，摇匀，用2,6-二氯靛酚溶 液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时，另取 10ml浸提剂做空白试验。
滴定度按式（1）计算： C·V 滴定度 T(mg/ml)=─────………………………… （1） V1-V2 式中： T-─每毫升2,6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数； C-─抗坏血酸的浓度，mg/ml; V-─吸取抗坏血酸的体积， ml; V1-─滴定抗坏血酸溶液所用 2,6-二氯靛酚溶液的体积，ml; V2-─滴定空白所用2,6-二氯靛酚溶液的体积，ml。 4.4 白陶土（或称高岭土），对维生素C无吸附性。
5 测定步骤 5.1 样液制备：称取具有代表性样品的可食部分100g，放入组织捣碎机中，加 100ml浸 提剂，迅速捣成匀浆。称 10~40g浆状样品，用浸提剂将样品移入 100ml容量瓶，并稀释 至刻度，摇匀过滤。
若滤液有色，可按每克样品加 0.4g白陶土脱色后再过滤。 5.2 滴定：吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中，用已标定过的 2,6-二氯靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色 15s不褪色为止。
同时做空白试验。 6 结果计算 6.1 计算公式： 维生素 C按式（2）计算： （V-V0）·T·A 维生素C(mg/100g)=────────-*100 …………………（2） W 式中： V--滴定样液时消耗染料溶液的体积，ml; V0--滴定空白时消耗染料溶液的体积，ml;T--2,6-二氯靛酚染料滴定度，mg/ml; A--稀释倍数； W--样品重量，g。
6.2 平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后两位数字。 6.3 平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于20mg/100g时，不得超过2%，小于 20mg/100g时，不得超过 5%。
5.怎样用试剂测量蔬果中维生素的含量
维生素C是维持人体正常生理功能的必需化合物，对缺铁性贫血和坏血病有预 防和治疗作用。
人体所需的维生素C主要由蔬菜水果提供，测定蔬菜水果中维生素C含量对评 价人群维生素C摄入量有重要意义。因品种、栽培方法和地区不同，食物中维生素C的含量差 异甚大。
以往本省对各种食物中的维生素C未进行过较系统的测定，本文用邻苯二胺荧光分 光光度法对本省常见蔬菜、水果中维生素C进行了测定，方法灵敏、准确度高，为不同人群 的膳食计划制定和有关科研提供了必要的基础数据。现将结果报告如下： 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 日立850型荧光分光光度计、打碎机、维生素C标准、邻苯 二胺、活性碳（市售品需活化后使用）、草酸、硼酸、醋酸钠、醋酸及硫酸。
1.2 样品采集 蔬菜以福州地区为主采集，水果样品从产地采集，每种样品 分别在同一地区分3处采集，取等量混合后做分析样品。 1.3 样品处理 取样品可食部加等量草酸-醋酸液于捣碎机中捣碎，称取适 量捣碎后的匀浆用草酸-醋酸-硫酸溶液调节pH=1.2后，用草酸-醋酸溶液定溶至50 ml，在5 0 ml样液及标准应用液中各加1 g活性碳振摇1 min，过滤后备用。
1.4 测定步骤 1.4.1 氧化及荧光物质衍生过程 活性碳将样品中的还原型抗坏血酸氧化 为脱氢抗坏血酸，然后脱氢抗坏血酸与邻苯二胺反应生成有荧光的喹喔啉衍生物（quinoxali ne）用以测定食物中的总抗坏血酸，样品中的一些干扰物质产生的荧光会影响测定，加入硼 酸作为掩蔽剂后，脱氢抗坏血酸与硼酸反应生成复合物，不能再与邻苯二胺生成荧光物质， 利用这一反应特点，在加入硼酸后测出的荧光强度即可作为空白以校正干扰产生的影响。 1.4.2 相对荧光强度测定 根据对发射和激发波长扫描结果，选用发射和 激发波长分别为340 nm和425 nm，狭缝5 nm，分别测定各管及标准管相对荧光强度，绘制标 准曲线，根据标准曲线计算样品中维生素C的相当浓度。
每份样品均进行平行测定，平行误 差应小于10%。结果以平行样品的平均值计算。
2 结果与讨论 2.1 各类食物中的维生素C含量测定结果 测定了6类82种食物中的维生素C含量，结果表明各种食物中维生素C含量差异较大，同类食 物中的不同品种含量差异也较大，叶类蔬菜中维生素C含量高于瓜果类、根茎类，且有颜色 越深维生素C含量越高的趋势。蔬菜中含量最高的为芥菜和青椒，分别为47 mg/100 g、44 mg /100 g，水果中含量最高的为余干62 mg/100 g，其次为番石榴和荔枝，分别为60 mg/100 g 和48 mg/100 g，动物性食物中除肝脏和肾脏含有少量维生素C外其它都不含维生素C（表1）。
2.2 蔬菜人体维生素C的主要来源 通常情况下蔬菜是人体维生素C的主要来源，尤其在农村地区一般人们较少食用水果。因蔬 菜中的维生素C在储存和烹调加工过程会造成不同程度破坏，尤其是烹调不当会造成维生素C 大量损失，而水果中的维生素C在储存过程损失较少，又不存在烹调问题，可被人体充分利 用，因此应提倡多吃水果，加上其它食物，则可以保证人体有足量的维生素C摄入。
本次采用邻苯二胺荧光分光光度法对4种成品茶叶进行了多次测定，未能测出维生素C，与 资料比较有所差异，考察茶叶制作过程，鲜茶采摘后要经过搓、挤汁、发酵（红茶、乌龙茶） 最后烘干制成，在经过这一系列的制作过程后，鲜茶叶中虽含有较高的维生素C也已损失贻 尽。对资料中显示的茶叶维生素C含量其结果还需进一步探讨。
表1 各类食物中维生素C 含量平均值（mg/100g） 食物 种类 维 生 素C 食物 种类 维生 素C 鲜豆类 18 番石榴 60 其中青豆 35 荔 枝 48 绿豆芽 5 橄 榄 3 根茎类 10.9 干 蔗 2 其中莲藕 29 其它类 马铃薯 21 桂圆干 12 姜 3 花生仁 0 嫩茎、叶、花类 16.2 莲 子 0 其中芥蓝 47 粟 子 26 菠 菜 29 猪 心 3 茭 白 5 猪 肝 14 芦 笋 4 牛 奶 1 瓜、茄果类 11.8 蜂 蜜 1.2 其中青椒 44 乌龙茶 0 丝 瓜 5 红 茶 0 西 瓜 4 绿 茶 0 鲜水果类 21.4 茉莉花茶 0 其中余干 62。
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