1.如何让电泳图谱的结果清晰,酶切前后差异明显
首先你要保证质粒的浓度,太高了不行,酶切不完全会出现多条带,太低了,那就得不到结果清晰的效果,通常浓度100ng/ul 的质粒 我做20ul酶切体系:水15ul buffer 2ul 质粒2ul 酶1ul 这样切出来的效果还是挺好的,其次你要保证你切的东西跑胶出来的片段大小相差不能太小,比如你要的效果是电泳跑出2700bp和1000bp大小的两个条带,再按照上面我说的体系切,一般会有很好的效果 。
我这边主管曾让我做过一个3.8K和4.2K的大小验证,跑好久才看到两个带分离。而且效果还不明显! 还有对于做的胶也有要求,溶胶时保证浓度均匀。
一般来说软一点的胶容易让带跑得分开一点!基本上我所知道的就这样了,希望对你有所帮助。
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