众文网1.
function dark = darkChannel(imRGB)
r=imRGB(:,:,1);
g=imRGB(:,:,2);
b=imRGB(:,:,3)； 分别提取三色的灰度图
[m n] = size(r)； 提取单色图矩阵的宽度和长度
a = zeros(m,n)； 创建m*n的零矩阵a
for i = 1: m
for j = 1: n
a(i,j) = min(r(i,j), g(i,j));
a(i,j)= min(a(i,j), b(i,j)）； 依次比较三色分量的最小值提取为暗通道图
end
end
d = ones(15,15)； 创建15*15的单位矩阵
fun = @(block_struct)min(min(block_struct.data))*d;
dark = blockproc(a, [15 15], fun)； 将图片分成15*15的小块并将每一块变成其中的最小值
dark = dark(1:m, 1:n);
我也是新手啊兄弟只能帮你到这儿了
2.DNF四叔炼狱套毕业属性魔攻 属强 多少合格
职业：审判者等级：70总SP:7470已用SP:5165剩余SP:2305总TP:21已用TP:0剩余TP:21总QP:0已用QP:0剩余QP:0=======【技能分类】=================-------【普通】---------------------虎袭，等级：1空斩打，等级：1强制 - 空斩打，等级：1武器祝福，等级：5直拳冲击，等级：1落凤锤，等级：1恶魔之手，等级：5攻击类型转换，等级：1化魔，等级：10（前期图作用不明显，由于后期高难度图高硬直怪 x轴突击怪的存在让复仇者几乎不能依靠平x来蓄力，此时化魔一次能附加大量恶魔能量，刷图必满）强制 - 虎袭，等级：1(10点sp而已性价比极高)天使祝福，等级：10（全程保持的buff技能，性价比胜过远古）-------【转职】---------------------恶魔袭击，等级：17（复仇者的灵魂技能，大部分技能百分比较低情况下复仇输出的保障，浮空推怪爆发都不是问题，必满）镰刀精通，等级：1（这个后面会解释）噩梦，等级：8（增加觉醒后的恶魔能量增加速度和攻击力，如果满了觉醒此技能必满）天灾降临，等级：1（单hit复仇爆发力最高的技能，释放时能生成可以移动聚怪的魔法阵，聚怪输出一体，觉醒状态下还能增幅20%的攻击，必满）伏魔殿，等级：3(x轴攻击技能，有少量y轴判定，攻击距离远伤害也不错觉醒，状态下还能增幅20%的攻击，必满)死亡切割，等级：5厄运之轮，等级：3黑暗之触，等级：16(40级无色技能，能将怪物聚集到自身前方，有y轴判定，能聚怪伤害不错必满)魔化末日审判者，等级：11（觉醒技，变身时大约3秒无敌，变身后全程霸体无视异常状态，攻击固伤，除了2个ex主动技能其他技能均不能使用，除了神壕都会满的吧）黑暗权能，等级：13(45级无色，复仇攻击最高的技能，除无敌外其他任何怪物都能控制，期间还能追加8次左右的恶魔追击（需要有远古3支持），控怪爆发一体，必满）幻听，等级：10（能够增幅无视的被动技能，虽然有减血蓝上限的副作用，依旧是必满技能）恶魔幻影，等级：16（一次消耗50点恶魔能量，增加200智力、16点暗强持续45秒，性价比一般的主动buff，还是推荐满上）强制 - 死亡切割，等级：1-------【通用】---------------------重甲精通，等级：1后跳，等级：1强制 - 后跳，等级：1基础精通，等级：70复仇者重甲专精，等级：1受身蹲伏，等级：1魔法暴击，等级：10（法系基本都会满的）复仇者特性技能：1、ex恶魔追击是必满的，增加攻击的同时还能增加恶魔能量的上限，3级消耗6点tp2、ex厄运之轮除了增加攻击力之外释放的时候按住后方向键能缓慢移动也就是变相的让怪吃到更多的伤害，总共一级 消耗4点tp，满了轮子的同学非常推荐点上3、剩下的11点tp大家可以自行斟酌，估计国服ex被动暂时也不会马上全部开放，具体需要等游戏实际情况再来考虑复仇者的个性技能：智力，魔爆和属强是必满的就不解释了命中：必须要点，但是是否点满要看个人的情况而言，一般认为命中在15%以上就基本能满足需求了独立攻击：由于坑爹的性价比加上复仇作为纯百分比职业只有觉醒和黑手是固伤，所以不是非常推荐点上MP回复：完全没有必要点，因为四叔重甲精通是可以回蓝而并非像之前所说的那样不能回蓝并且会经常使用化魔 所以mp是非常充足的精神：因为可以增幅天使的效果可以考虑点上体力：由于四叔满幻听先天贫血，加上经常要使用化魔积攒恶魔能量，所以四叔点上体力效果是很不错的，如果满了缓慢愈合那么非常推荐点高体力HP回复：如果满了缓慢不点也可以，如果没点缓慢，HP回复只需要8级就有一定的回复效果点上的话还是有点用移动：嫌四叔跑的慢的话就点上吧。
3.计算机毕业答辩一般会提什么问题
主答辩老师的提问方式 1.提问要贯彻先易后难原则.主答辩老师给每位答辩者一般要提三个或三个以上的问题，这些要提的问题以按先易后难的次序提问为好.所提的第一个问题一般应该考虑到是学员答得出并且答得好的问题.学员第一个问题答好，就会放松紧张心理，增强"我"能答好的信心，从而有利于在以后几个问题的答辩中发挥出正常水平. 2.提问要实行逐步深入的方法.为了正确地检测学员的专业基础知识掌握的情况，有时需要把一个大问题分成若干个小问题，并采取逐步深入的提问方法. 3.当答辩者的观点与自己的观点相左时，应以温和的态度，商讨的语气与之开展讨论，即要有"长者"风度，施行善术，切忌居高临下，出言不逊.不要以"真理"掌握者自居，轻易使用"不对"，"错了"，"谬论"等否定的断语.要记住"是者可能非，非者可能有是"的格言，要有从善如流的掂量.不必将自己的观点强加于人，只要把自己的观点亮出来，供对方参考就行. 4.当学员的回答答不到点子上或者一时答不上来的问题，应采用启发式，引导式的提问方法.参加过论文答辩委员会的老师可能都遇到过这样的情况：学员对你所提的问题答不上来，有的就无可奈何地"呆"着；有的是东拉西扯，与你绕圈子，其实他也是不知道答案.碰到这种情况，答辩老师既不能让学员尴尬地"呆"在那里，也不能听凭其神聊，而应当及时加以启发或引导.只有通过启发和引导仍然答不出或答不到点子上的，才可判定他确实不具备这方面的知识. 三，学员答辩要注意的问题 学员要顺利通过答辩，并在答辩时真正发挥出自己的水平，除了在答辩前充分作好准备外，还需要了解和掌握答辩的要领和答辩的艺术. （一）携带必要的资料和用品：首先，学员参加答辩会，要携带论文的底稿和主要参考资料.在答辩会上，主答辩老师提出问题后，学员可以准备一定时间后再当面回答，在这种情况下，携带论文底稿和主要参考资料的必要性是不言自明的.其次，还应带上笔和笔记本，以便把主答辩老师所提出的问题和有价值的意见，见解记录下来.通过记录，不仅可以减缓紧张心理，而且还可以更好地吃透老师所提问的要害和实质是什么，同时还可以边记边思考，使思考的过程变得很自然. （二）要有自信心，不要紧张：在作了充分准备的基础上，大可不必紧张，要有自信心.树立信心，消除紧张慌乱心理很重要，因为过度的紧张会使本来可以回答出来的问题也答不上来.只有充满自信，沉着冷静，才会在答辩时有良好的表现.而自信心主要来自事先的充分准备. （三）听清问题后经过思考再作回答：主答辩老师在提问题时，学员要集中注意力认真聆听，并将问题回答略记在本子上，仔细推敲主答辩老师所提问题的要害和本质是什么 切忌未弄清题意就匆忙作答.如果对所提问题没有断清楚，可以请提问老师再说一遍.如果对问题中有些概念不太理解，可以请提问老师做些解释，或者把自己对问题的理解说出来，并问清是不是这个意思，等得到肯定的答复后再作回答.只有这样，才有可能避免答所非问.答到点子上. （四）回答问题要简明扼要，层次分明：在弄清了主答辩老师所提问题的确切涵义后，要在较短的时间内作出反应，要充满自信地以流畅的语言和肯定的语气把自己的想法讲述出来，不要犹犹豫豫.回答问题，一要抓住要害，简明扼要，不要东拉西扯，使人听后不得要领；二要力求客观，全面，辩证，留有余地，切忌把话说"死"；三要条分缕析，层次分明.此外还要注意吐词清晰，声音适中等等. （五）对回答不出的问题，不可强辩：有时答辩委员会的老师对答辩人所作的回答不太满意，还会进一步提出问题，以求了解论文作者是否切实搞清和掌握了这个问题.遇到这种情况，答辩人如果有把握讲清，就可以申明理由进行答辩；如果不太有把握，可以审慎地试着回答，能回答多少就回答多少，即使讲得不很确切也不要紧，只要是同问题有所关联，老师会引导和启发你切入正题；如果确是自己没有搞清的问题，就应该实事求是地讲明自己对这个问题还没有搞清楚，表示今后一定认真研究这个问题，切不可强词夺理，进行狡辩.因为，答辩委员会的老师对这个问题有可能有过专门研究，再高明的也不可能蒙骗他.这里我们应该明白：学员在答辩会上，某个问题被问住是不奇怪的，因为答辩委员会成员一般是本学科的专家.他们提出来的某个问题答不上来是很自然的.当然，所有问题都答不上来，一问三不知就不正常了. （六）当论文中的主要观点与主答辩老师的观点相左时，可以与之展开辩论： 答辩中，有时主答辩老师会提出与你的论文中基本观点不同的观点，然后请你谈谈看法，此时就应全力为自己观点辩护，反驳与自己观点相对立的思想.主答辩老师在提问的问题中，有的是基础知识性的问题，有的是学术探讨性的问题，对于前一类问题，是要你作出正确，全面地回答，不具有商讨性.而后一类问题，是非正误并未定论，持有不同观点的人可以互相切磋商讨.如果你所写的论文的基本观点是经过自己深思熟虑，又是言之有理，持之有据，能自圆其说的，就不要因为答辩委员会成员提出不同的见解，就随声附和，放弃自己的观。
4.关于李煜词的论文我们要写一篇毕业论文题目是李后主的词心与词境
李煜大事年表·后晋天福二年，南唐升元元年（公元937年），1岁，七月七日，李煜生。
·后周显德元年，南唐保大十二年（公元954年），18岁，娶娥皇。·后周显德五年，南唐中兴元年（公元958年），22岁，长子仲寓生。
·后周显德六年（公元959年），23岁，九月太子弘翼卒，李煜自郑王徙封吴王·北宋建隆二年（公元961年），25岁，二月，立为太子。七月，继位于金陵。
尊母钟氏为圣尊后，立娥皇为皇后。遣使如宋表陈袭位。
次子仲宣生于此年。·北宋建隆三年（公元962年），26岁，三月，遣使赴宋朝贡。
六月，遣使赴宋朝贡。十一月，遣使赴宋朝贡。
·北宋乾德元年（公元963年），27岁，三月，宋平荆南，遣使犒师。十一月，宋改元。
·北宋乾德二年（公元964年），28岁，三月，始行铁钱。十一，次子仲宣卒。
十一月，皇后娥皇卒，亲撰·北宋乾德三年（公元965年），29岁，正月，葬昭慧后于懿陵。四月，宋灭蜀。
贡银绢万计。九月，母圣尊后钟氏卒。
·北宋乾德四年（公元966年），30岁，奉诏匡胤命，约南汉俱宋事，未成。宋始决议伐南汉。
·北宋开宝元年（公元968年），32岁，南唐大饥。六月，遣弟从谦赴宋朝贡。
十一月，娶小周后并立为皇后。·北宋开宝二年（公元969年），33岁，猎青龙山，录囚大理寺，诸郡普渡僧尼。
·北宋开宝四年（公元971年），35岁，遣弟从谦入宋，贡珍宝数倍于前。十月，遣弟从善入宋朝贡。
上表请去南唐国号，印文改为江南国，自称江南国主。·北宋开宝五年（公元972年），36岁，正月，贬损仪制，改诏为教，衣紫袍见宋。
闰二月，宋留从善为泰宁军节度使。于汴梁建礼贤馆，待李煜降。
·北宋开宝七年（公元973年），37岁，上表愿受宋爵命，宋不许。杀名将林仁肇。
·北宋开宝七年（公元974年），38岁，上表宋，求从善归国，宋不许。 遣使诏李煜入朝，不行，遂伐南唐。
·北宋开宝八年（公元975年）39岁，六月，宋军与吴越兵围金陵。赵匡胤谕降。
十一月二十七日，城破。李煜率子弟及官属4人出降。
北上汴梁，南唐亡。·北宋太平兴国元年（公元976年），40岁，正月，受封右千牛卫上将军，违命侯。
十一月，进封陇西公。·北宋太平兴国三年（公元978年），42岁，七月七日，被赵光义毒杀。
追封吴王。十月，以王礼葬于北邙山。
小周后亦卒于此年，于李煜同葬。生平简介初名从嘉，字重光，号钟隐，又号莲峰居士。
南唐中主第六子。彭城（今江苏徐州）人。
宋建隆二年（961年）在金陵即位，在位十五年，世称李后主。他嗣位的时候，南唐已奉宋正朔，苟安于江南一隅。
宋开宝七年（974年），宋太祖屡次遣人诏其北上，均辞不去。同年十月，宋兵南下攻金陵。
明年十一月城破，后主肉袒出降，被俘到汴京，封违命侯。 太宗即位，进封陇西郡公。
太平兴国三年（978年）七夕是他四十二岁生日，宋太宗恨他有“故国不堪回首月明中”之词，命人在宴会上下牵机药将他毒死。追封吴王，葬洛阳邙山。
李煜的词，可以分为前后两期，以宋太祖开宝八年（975年）他降宋时作为界线。 前期的词已表现出他非凡的才华和出色的技巧，但题材较窄，主要反映宫廷生活与男女情爱，如〔玉楼春〕"晚妆初了明肌雪"、〔喜迁莺〕"晓月坠"、"宿云微"、〔一斛珠〕"晚妆初过"、〔菩萨蛮〕"花明月暗飞轻雾"等；也有写离别相思的作品如〔清平乐〕"别来春半"等，写景抒情，融成一片，比较健康可读。
到了后期，李煜由小皇帝变为囚徒。屈辱的生活，亡国的深痛，往事的追忆，"此中日夕只以眼泪洗面"（王□《默记》），使他的词的成就大大超过了前期。
〔破阵子〕"四十年来家国"反映了他身世与词风的转折。《虞美人》"春花秋月何时了"、〔浪淘沙〕"帘外雨潺潺"、〔乌夜啼〕"林花谢了春红"、"无言独上西楼"等是他后期的代表作，主要抒写自己凭栏远望、梦里重归的情景，表达了对"故国"、"往事"的无限留恋，抒发了明知时不再来而心终不死的感慨，艺术上达到很高的境界。
李煜的词，继承了晚唐以来温庭筠、韦庄等花间词人的传统，又受了李璟、冯延巳等的影响，将词的创作向前推进了一大步。其主要成就表现在：①扩大了词的表现领域。
在李煜之前，词以艳情为主，内容浅薄，即使寄寓一点怀抱，也大都用比兴手法，隐而不露。 而李煜词中多数作品则直抒胸臆，倾吐身世家国之感，情真语挚。
所以王国维说："词至李后主而眼界始大，感慨遂深，遂变伶工之词而为士大夫之词。"（《人间词话》）②具有较高的概括性。
李煜的词，往往通过具体可感的个性形象来反映现实生活中具有一般意义的某种境界。 "小楼昨夜又东风，故国不堪回首月明中"（〔虞美人〕）、"流水落花春去也，天上人间"（〔浪淘沙〕）、"自是人生长恨水长东"（〔乌夜啼〕）、"离恨恰如春草，更行更远还生"（〔清平乐〕）等名句，深刻而生动地写出了人生悲欢离合之情，引起后世许多读者的共鸣。
③语言自然、精炼而又富有表现力。他的词不镂金错彩，而文采动人；不隐约其词，却又情味隽永；形成既清新流丽又婉曲深致的艺术特色。
④在风格上有独创性。《花。
5.摘要翻译我在写毕业论文,现在想请好心人帮忙翻译一下摘要,谢谢希
Study on reasons and strategies of the unbalanced distribution of urban and rural education resources in China ---in the case of zhangjiajie city Abstract Education resources are the presupposition of existence and development of schools。
The unfair phenomenon caused by the unbalanced distribution of education resources has become a problem which catches joint attention of society, department of education and government。 In recent years, China's overall economic level has achieved sustained growth and ranks the second in the world, surpassing Japan。
However, China is a country with large population and low per-capita resources。 This is the fundamental reason of the unbalanced distribution of education resources in urban and rural areas in China。
This paper takes the case of Zhangjiajie city as an example and compare the distribution of education resources in urban and rural areas。 Thus it will conduct a deep-going study on the reasons of the unbalanced distribution of Chinese education resources and propose several measures to solve the problem。
The unbalanced distribution of education resources is common in China。 But the author holds the view that the situation will be improved with efforts and the students and teachers in urban and rural areas will gain equal treatments。
key words: education resources;urban and rural areas;fair PS：有一些个人建议，摘要里面“教育资源分配失衡”一词出现太过频繁；另外，最后那句“我相信”太过主观，不应该出现在论文里，建议改成“作者认为”。
6.毕业论文关于VI设计的怎么写
传统的VI设计是静态的，以标准化的图形和颜色作为视觉传达的要素。但仔细观察可口可乐新的中文标识和包装，你会发现设计师在细微之处的调整：新包装及标志的红色背景中加入了暗红色的弧线，整体红色变得更有深度和动感，并产生了多维的透视效果。罐身包装的侧面设计了崭新的“气泡弧型瓶”，既保留了原有弧形瓶的原创性，又体现了新的动感效果。多层次的飘带图案，和飘带中的银色边线及飘带两侧的气泡更强调了活力和现代感。经过微妙的调整和添加，原有的视觉元素“活”了起来。设计师就是通过这种方法力图使设计突破二维媒介的局限，创造一种视觉上动态的效果。
我国的VI设计长期以来也是以一种静止和程式化的形态呈现的，缺乏新意和活力。其原因是设计观念上束缚太深。特别是标志设计，我们常将其理解为一张脸，好比IBM，造型和构成方式在不同的载体和环境中使用都具有一致性和稳定性。20世纪末，数字化媒体出现，社会环境也发生了质的变化。电脑技术在设计上的广泛应用挑战着艺术设计形式，同时也充实着设计的外延。多元化的视觉观念也暗示着新视觉传达方式将要打破传统设计门类的界限，让设计成为一种能融合多种学科的载体。许多设计师已经不再满足于原有VI设计仅局限在平面和静态的状况。尤其是在FLASH等简单而好用的动画软件面世后，各种动画形式的VI设计面世，也有在平面的媒介上表现超平面的动态效果的。总之VI打破了“静”的传统，逐步开始“动”了起来。国外类似的尝试早就在进行着。现在国外的标识设计早已打破传统规则，在静止的二维平面中加入“时间”和“表情”，在应用中丰富和灵活的展现。从可口可乐的VI变化上，我们可以感受到这一点。NIKE 、SONY公司设计的的推广片段更进一步证明了视觉传达设计由静态向动态的新走向。
7.有没有关于中日韩文化比较论文不要全篇在网上挡得那种哦谢谢 爱问知
朝鲜族作家金文学在他的新作《东亚三国志》中，对中日韩三国的文化、历史、传统、习俗、观念、社会、生活等方面进行了有趣的比较与分析。
红色中国 原色韩国 杂色日本 对中国人来说，红色意味着吉兆和财运，即所谓红红火火。 过春节时，门框上贴上红对联，过元宵节挂上红灯笼，新娘新婚穿红色的礼服。
日本人则避免鲜艳的颜色，喜欢灰和淡褐色等中间色。
我把这种中间色称为杂色。日本年轻女性的时装，多为淡褐色的套装和藏青色的制服；日本男性的时装也和女性的一样有同样的杂色倾向。
韩国人在服装和色彩感觉上比中国和日本都要五彩缤纷鲜艳夺目得多。比如，赤、橙、黄、绿、青等，全是原色。
崇尚个人主义的韩国人，是用鲜艳夺目的时装来突出自己的个性，强调自我的主张；中国人没有韩国人那么强烈的个人主义主张，但是却以红色来表达自己的个人意志，同时又在某种程度上兼顾社会集团的意志；在东亚，日本人最无个性，习惯于集团主义，所以色彩偏于杂色，款式趋于统一。 中国的“忍” 韩国的“恨” 日本的“劈” 假如用一个字来概括中、韩、日文化，我的选择如下：中国——“忍”文化；韩国——“恨”文化；日本——“劈”文化。
日本人多认为韩国“恨”的文化就是指韩国人对日本人恨之入骨。 这是很大的误解。
韩国崔吉城教授在其大作《恨的人类学》中认为，“恨”，决不是怨恨。“恨”是沉淀在自己本身内心里的情感，没有具体怨恨谁那样的复仇的对象。
“恨”，是对未能实现的梦想的憧憬。韩国具有代表性的民谣《阿里郎》，堪称表现恨文化的极致。
与韩国文化的“恨”相对的是日本文化的“劈”志向。 刀堪称日本文化神髓，武士的命根子。
用刀劈，这一劈的动作，使日本文化“劈的志向”得以完成。说日本文化是劈出来的，这也不为过。
把外来文化“劈”而取之，剖腹文化，剖筷子文化，盆栽和庭院，插花，都是大同小异。 中国的文化，是“忍”。
“忍”意味着“心字头上一把刀”，让你感受到剜心绞肺般疼痛，却一定要顶住。中国人的忍耐力，恐怕是世界第一。
它是在贫困的环境和连年不断的战乱中培养起来的“人生哲学”。 插花的残忍美 缠足的人工美 庭院的自然美 插花是集中地反映了日本“视觉”美的艺术。
在这个美的世界里，我渐渐发现了它的残酷性。日本插花的美学的核心是“剪的美学”。
而在中国和韩国，插在花瓶里，却是不加任何修饰地进行观赏。日本插花美看起来静默寂寥，但其背后却隐藏着残忍的一面。
这种寂静美与残忍性的共存是日本艺术的真正面目。 中国也有这种违背自然追求人工美的东西，那就是古代中国妇女的缠足。
为追求“三寸金莲”的人工美，女性从小就被强行用布条颤起脚，使女性的跖骨变形脱臼。 韩国艺术价值取向最接近自然。
同时庭院，韩国的却不是缩小自然，切割开来使其再生。因为房子本身就是在自然中建造起来的，所以他们觉得没有对其进行再加工的必要。
坐在房子里隔着篱笆向远处望去，自然总是与人共生共存。 三国其他有趣差异 ——中国人到处是墙，心中有墙，因此历史上闭关锁国；日本人地上无墙，心中无墙，因此能大量吸收外来文化；韩国人大多是半截墙，因此半遮半掩，对外来文化欲拒还迎，心态复杂。
——中国是大陆德行，圆滑世故，雍容大度；日本是岛国德行，心胸狭窄，细致认真；韩国是半岛德行，自尊心强，心怀“怨恨”。 ——中国人喜欢牡丹，国色天香，象征荣华富贵；日本人喜欢樱花，刹那盛开，瞬间凋零，象征残酷之美；韩国人喜欢木槿，质朴无华，小家碧玉，却不屈不挠，顽强生存。
——中国人喜欢看《三国演义》，讲国家大事，规模宏大，像百科全书，将文治武功熔于一炉；日本人喜欢《忠臣藏》，讲武士搏杀，刀光剑影，残忍冷酷；韩国人喜欢《春香传》，讲才子佳人，对诗传情，和美优雅。 （《东亚三国志》 金文学著 中信出版社出版）。
8.写一篇关于植物细胞或动物细胞的论文,五百字
《激光扫描共聚焦显微镜系统及其在细胞生物学中的应用》 摘要激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图象分析仪器，现已广泛应用于荧光定量测量、共焦图象分析、三维图象重建、活细胞动力学参数监测和胞间通讯研究等方面。
其性能为普遍光学显微镜质的飞跃，是电子显微镜的一个补充。本文以美国Meridian公司的ACASULTIMA312为例简要介绍了激光扫描共聚显微镜系统的结构，功能和生物学应用前景。
关键词； 激光；共聚焦显微镜；粘附细胞分析与筛选（ACAS） ChenYaowen,LinJielong,LaiXiaoying,MeiPinchao (ShantouUni.Med.College,CentralLab,) ,.,,3-Dreconstruction,,,etc.Inthispaper,ACSAULTIMA312(MeridianCo,USA),. (ACSA) 激光扫描共聚焦显微镜（，简称LSCM）是近代生物医学图象仪器的最重要发展之一，它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图象处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。已广泛应用于细胞生物学、生理学、病理学、解剖学、胚胎学、免疫学和神经生物学等领域[1、2、3]，对生物样品进行定性、定量、定时和定位研究具有很大的优越性，为这些领域新一代强有力的研究工具。
创建于1983年的美国Meridian公司，在90年代推出的“激光扫描共聚焦显微镜”这一项具有划时代的义意的高科技产品，曾获得美国“政府新产品奖”和两次“高科技领先技术奖”，它能达到每秒120幅画面的高速扫描激光共聚焦观察，可提供实时，真彩色的激光共聚焦原色图象。我院最近引起的ACASuLTIMA312是Meridian公司最新的高科技产品，为同类仪器中档次最高、功能最全的精密仪器。
现以该仪器为例介绍激光扫描共聚焦显微镜系统及其在细胞生物学中的应用。 1、激光扫描共聚焦显微镜成像原理及组成 有关共聚焦显微镜的某些技术原理，早在1957年就已提出，二十年后由Brandengoff在高数值孔径透镜装置上改装成功具有高清晰度的共聚焦显微镜[5],1985年WijnaendtsVanResandt发表了第一篇有关激光扫描共聚焦显微镜在生物学中应用的文章，到了1987年，才发展成现在通常意义上的第一代激光扫描共聚焦显微镜。
激光扫描共聚焦显微镜成像原理如图1所示，激光器发出的激光束经过扩束透镜和光束整形镜，变成一束直径较大的平行光束，长通分色反射镜使光束偏转90度，经过物镜会聚在物镜的焦点上，样品中的荧光物质在激光的激发下发射沿各个方向的荧光，一部分荧光经过物镜、长通分色反射镜、聚焦透镜、会聚在聚焦物镜的焦点处，再通过焦点处的针孔，由检测器接收。 从图1中可以看出，只有在物镜的焦平面上发出的荧光才够到达检测器，其它位置发出的光均不能过针孔。
由于物镜和会聚透镜的焦点在同一光轴上，因而称这种方式成像的显微镜为共聚焦显微镜为共聚显微镜。在成像过程中针孔起着关键作用，针孔直径的大小不仅决定是以共聚焦扫描方式成像还是以普遍学显微镜扫描方式成像，而且对图像的对比度和分辨率有重要的影响。
ACASULTIMa312采用快速镜扫描或台阶扫描对样品逐点扫描成像，由于样品中不同的扫描点始终在物镜和会聚透镜的光轴上，因而它以相同的信噪比扫描整个样品，扫描精度达0.1μm，扫描面积最大的为10cm*8cm，当激光逐点扫描样品时，针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光点的共聚焦图像，并将之转化为数字信号传输至计算机，最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面的共聚聚焦图像。一个微动步进马达控制栽物台的升降，使焦平面依次位于标本的不同层面上，可以逐层获得标本相应的光学横断面的图像。
这称为“光学切片”。再利用计算机的图像处理及三维重建软件。
可以得到高清晰度来表现标本的外形剖面，十分灵活、直观地进行形态学观察。 2、激光扫描共聚焦显微镜硬件和软件系统 2.1ACASULTIMa312硬件及参数指标 激光光源：氩离子激光（50mW的紫外光、999mW的可见光），能同时/顺序/分别输出紫外光和可见光，激发波长为351-364nm;488nm;514nm。
计算机系统：80586/133MHzPCI/80MBRAM/2000MBSCSI硬盘/150MBBernoulli盘驱动器/17''大屏幕显示器。 共聚焦系统：计算机自动控制光路准调节；计算机控制孔径校准；计算机调节孔径大小；自动Z轴调节（最小0.1μm）。
光学探测系统：3个测窗式PMT采集荧光；。
转载请注明出处众文网 » 暗原色去雾毕业论文()